Активные формы кислорода. Антиоксидантная защитная система. Перекисное окисление липидов. автор – доцент Рыскина Е.А. - презентация

1 Активные формы кислорода. Антиоксидантная защитная система. Перекисное окисление липидов. автор – доцент Рыскина Е.А.

2 Свободные радикалы. Химические соединения, имеющие высокую реакционную способность, благодаря наличию в составе одного или двух неспаренных электронов на внешней орбитали, называются свободными радикалами. Радикал может образоваться в результате потери одного электрона или при получении одного электрона нерадикальной молекулой. Для биологических систем наиболее важны кислородные свободные радикалы (R.)

3 Кислородные свободные радикалы называют также активными формами кислорода (АФК) Кислород, необходимый организму для функционирования (в ЦПЭ и многих других реакций), является одновременно и токсическим веществом, если из него образуются активные формы кислорода (АФК). В норме в организме образуется около 2% АФК от всего кислорода, процесс образования идет спонтанно и подавить его трудно.

4 Факторы, вызывающие образование АФК

5 К активным формам кислорода относят: Основные АФК: ОН – радикал, гидроксильный радикал; О супероксидный анион; Н 2 О 2 - пероксид водорода. Важнейшими АФК также считаются : - синглетный кислород (1О 2 ), - пер гидроксил (НО 2 ), - гипохлорит анион (ClО-), - пероксинитрат (ОNOО-).

6 Как же образуются АФК? АФК образуются в результате последовательного присоединения электронов к молекуле кислорода. Конечный продукт реакций – вода. В ходе реакций образуются: О2- - супероксидный анион, Н 2 О 2 – пероксид водорода НО - гидроксильный радикал

7 Источники электронов в клетках Утечка электронов из ЦПЭ (убихинон) и непосредственное их взаимодействие с кислородом в митохондриях – основной путь образования АФК в клетках. Утечка электронов из микросом за счет цитохрома Р Превращение двухвалентного железа в трехвалентное в гемоглобине (реакция Фентона) и некоторые др.

8 АФК наносят огромный вред организму т.к. очень легко вступают в химические реакции. Для организма важно равновесие, образование не более 2% АФК. Такая нестабильная частица, сталкиваясь с другими молекулами, "крадет" у них электрон, что существенно изменяет структуру этих молекул. Пострадавшие молекулы стремятся отнять электрон у других "полноценных" молекул, вследствие чего развивается разрушительная цепная реакция, губительно действующая на живую клетку.

9

10 Что происходит если нарушается равновесие между образование и тушением АФК. Высокий уровень АФК приводит к образования окислительного стресса (активируется ПОЛ), который может вызвать апоптоз клетки или некроз ткани. Научно доказано что АФК повинны в развитии более 100 заболеваний, таких как: рак, атеросклероз, инфаркт, инсульт, ишемия, атеросклероз, заболевания нервной и иммунной систем и заболевания кожи.

11 Повреждающие действие АФК РАЗРУШЕНИЮ ПОДВЕРГАЮТСЯ: 1. Аминокислоты в белках (нарушается структура белков, между ними образуются ковалентные сшивки, эти белки гидролизуются) 2. Нуклеотиды в ДНК (окисление аденина и получение 8- гидроксиаденина, как следствие мутации) 3. Полиненасыщенные высшие жирные кислоты, входящие в состав липидов мембранн клеток.

12 АФК: повреждение белков Свободнорадикальное окисление нарушает структуру белков. В белках окисляются некоторые аминокислоты (лизин, аргинин и пролин). В результате разрушается структура белков, между ними образуются ковалентные "сшивки", всё это активирует протеолитические ферменты в клетке, гидролизующие повреждённые белки.

13

14 АФК атакуют липиды мембранны клеток В результате изменяются свойства мембранны: Микровязкость Выжигаются дыры в мембранне Изменяется проницаемость (набухание мембранны за счет утечки воды) Изменяется ионный состав Эти изменения нарушают жизнедеятельность клетки и приводят ее к гибели.

15 Активные формы кислорода запускают процесс перекисного окисления липидов (ПОЛ) Основным субстратом ПОЛ являются полиненасыщенные цепи жирных кислот (ВЖК), входящие в состав клеточных мембранн, а также липопротеинов.ВЖКклеточных мембран липопротеинов Их атака кислородными радикалами приводит к образованию гидрофобных радикалов, взаимодействующих друг с другом. В результате атаки АФК жирных кислот изменяются свойства мембранн (выжигаются дыры) и образуется конечный продукт малоновый диальдегид, который может вызывать денатурацию белков путем их сшивки.

16 Реакции ПОЛ являются свободнорадикальными и постоянно протекают в клетки

17 Первая стадия – инициация образования свободного радикала Вначале происходит атака сопряженных двойных связей ненасыщенных жирных кислот гидроксильным радикалом, что приводит к появлению липидных радикалов :липидных радикалов LH + НО* ---- H 2 O + L*.

18 Вторая стадия – развитие цепи Липидный радикал может реагировать с О 2 с образованием липопероксид радикала, который, в свою очередь, взаимодействует с новыми молекулами ненасыщенных жирных кислот и приводит к появлению липидных пероксидов, которые достаточно стабильны при температуре тела: L* + O LOО* LOО* + LH LOOH + L*.

19 Третья стадия- разрушение структуры липидов Образующиеся липидные радикалы, а также малоновый диальдегид (МДА), могут атаковать молекулы белков и нуклеиновые кислоты. Альдегидные группы этих соединений образуют межмолекулярные сшивки, что сопровождается нарушением структуры макромолекул и дезорганизует их функционирование.липидные радикалы

20 Образование МДА и сшивок между белками за счет МДА

21 Обрыв цепи - взаимодействие радикалов между собой: LOO + L LOOH + LH L + vit E LH + vit E vit E + L LH + vit Еокисл. Развитие цепи может останавливаться при взаимодействии свободных радикалов между собой или при взаимодействии с различными антиоксидантами, например, витамином Е, который отдаёт электроны, превращаясь при этом в стабильную окисленную форму.

22 АФК выполняют полезные функции. Активные формы кислорода необходимы организму, они участвуют во многих физиологических процессах, выполняя полезные функции: 1. Бактерицидную, лейкоциты с участием АФК разрушают фагоцитированные клетки бактерий, НАДФН-оксидаза нейтрофилов; 2. Иммунную - активирование иммунной реакции в лейкоцитах; 3. Регуляторную (сигнальные молекулы), до конца механизм не изучен.

23 В организме существует система защиты клеток от АФК (система тушения АФК ) или Антиоксидантная система (АОС) Антиоксиданты это молекулы, которые способны блокировать реакции свободнорадикального окисления, восстанавливая разрушенные соединения. Антиоксидантная система (АОС) включает: 1. Ферменты антиоксидантного действия; 2. Витамины, обладающие антиоксидантным действием. 3. Биофлавоноиды ( рутин, кверцетин, цитрин, гесперидин, аскорутин), серосодержащие аминокислоты (глютатион, цистеин, метионин), цитохром С, микроэлементы - селен, цинк и др.

24

25 Ферменты антиоксидантного действия: супероксиддисмутаза (СОД), каталаза и глутатионпероксидаза. СОД и каталаза образуют антиоксидантную пару, которая борется со свободными радикалами кислорода, не давая им возможности запустить процессы цепного окисления. Глутатионпероксидаза обезвреживает липидные перекиси, обрывая тем самым цепное перекисное окисление липидов. Для работы глутатионпероксидазы необходим селен.

26 Угроза для клеток со стороны активных радикалов устраняется действием ряда ферментов. СОД катализирует дисмутацию супероксида в кислород и пероксид водорода. Таким образом, она играет важнейшую роль в антиоксидантной защите практически всех клеток, так или иначе находящихся в контакте с кислородом. Каталаза предотвращает накопление в клетке перекиси водорода. В печени, почках, нейтрофильных лейкоцитах обнаруживается пероксидазная активность.

27 Витамины, обладающие антиоксидантным действием 1. Витамины группы Е (токоферолы) 2. Аскорбиновая кислота (витамин С) 3. Ретинол (витамин А) и β-каротин (провитамин А) Антиоксиданты работают хорошо только тогда, когда они работают в группе, поддерживая друг друга. Например: Витамин Е - главный прерыватель реакций окисления липидов, расходуется и видоизменяется в этих реакциях. Если рядом с ним находится витамин С, то он его восстанавливает и вводит в строй.

28 Витамин Е ингибирует свободнорадикальное окисление путем отдачи электрона, что приводит к инактивации радикала липида. Витамин Е превращается в стабильное соединение.

29

30 Пероксидазы, каталазы, оксигеназы и оксидазы относятся к классу ферментов - оксидоредуктаз Оксигеназы - это ферменты, катализирующие активирование О 2 и последующее включение 1 (монооксигеназы) или 2 (деоксигеназы) его атомов в молекулы различных субстратов. Если субстратом (акцептором О2) служит водород, фермент называют оксидазой. В этом смысле оксидазы можно рассматривать как специализированный класс оксигеназ. Оксигеназы участвуют во внемитохондриальном окислении.

31 Понятие об оксидазном и оксигеназном типе окисления 80% кислорода используется на оксидазный тип – это первый тип окисления, т.е. когда атом кислорода восстанавливается 2 электронами, или молекула кислорода 4-мя электронами. Например: супероксиддисмутаза и оксидазы аминокислот. 20% О2 используется на оксигеназный тип окисления, идет по 2 путям – монооксигеназному и диоксигеназному. Монооксигеназный путь происходит в митохондриях и микросомах. В митохондриях происходит гидроксилирование (при участии НАДФН2, ЦхР450). В микросомальном окислении участвует мульти ферментная мембранносвязанная система, включающая НАДФН2, особые ФП и цхР450.

32 Биологическое значение окисления по оксидазному типу: Окисляются трудноокисляемые циклические вещества; Быстрая инактивация БАВ - биологически активных веществ; Образующаяся Н 2 О 2 оказывает бактерицидное действие - разрушает клеточные мембранны фагоцитированных бактериальных клеток.