Антитела к SS-A/Ro SS-A/Ro антиген – полипептиды 60 kDa и 52 kDa, образующие комплекс с RoРНК (hY1, hY3 и hY5). Методы определения: ИФА, ИБ, ДИД и КИЭФ. - презентация

1 Антитела к SS-A/Ro SS-A/Ro антиген – полипептиды 60 kDa и 52 kDa, образующие комплекс с RoРНК (hY1, hY3 и hY5). Методы определения: ИФА, ИБ, ДИД и КИЭФ. Норма: 25 ЕД /мл при использовании ИФА (зависит от рекомендаций фирмы- изготовителя коммерческих наборов реагентов). Клиническое значение: 1. Положительные результаты обнаружения антител к SS-A/Ro являются диагностическими критериями первичного и вторичного СШ. 2. При беременности исследование сывороточного уровня антител к SS-A/Ro-52 kDa полезно для прогнозирования риска развития полной поперечной блокады сердца у плода, антител к SS-A/Ro – для прогнозирования риска развития неонатального волчаночноподобного синдрома у новорожденных. 3. У больных СКВ положительные результаты тестирования антител к SS-A/Ro ассоциируются с фотосенсибилизацией, поражением кожи, СШ, гиперпродукцией РФ. Кратность определения: Рекомендуемая частота определения антител к SS-A/Ro составляет 1 раз в 3 месяца.

2 Клиническая информативность определения антител к SS-A/Ro при СШ (ИФА) ПоказательСобственные данныеДанные литературы 1 ДЧ (%) ДС (%) ОППР ОПОР ,1 0, ,3 26 0,3 1.Reveille JD, Solomon DH, Schur PH, Kavanaugh AEvidence based guidelines for the use of immunologic laboratory tests: Anti-Ro (SS-A) and La (SS-B) Arthritis Care Res. 2013;in press

3 Клиническая информативность определения антител к SS-A/Ro при СКВ (ИФА) ПоказательСобственные данныеДанные литературы 1 ДЧ (%) ДС (%) ОППР ОПОР ,05 0,9 29,6 97,6 12 0,7 1.Reveille JD, Solomon DH, Schur PH, Kavanaugh AEvidence based guidelines for the use of immunologic laboratory tests: Anti-Ro (SS-A) and La (SS-B) Arthritis Care Res. 2013;in press

4 Антитела к SS-B/La SS-B/La антиген–нуклеоцитоплазматический комплекс 48 kDa фосфопротеина с Ro РНК (hY1-hY5), являющийся терминальным транскрипционным фактором для РНК полимеразы III. Методы определения: ИФА, ИБ, ДИД и КИЭФ. Норма: 25 ЕД /мл при использовании ИФА (зависит от рекомендаций фирмы- изготовителя коммерческих наборов реагентов). Клиническое значение: 1. Положительные результаты обнаружения антител к SS-B/La являются диагностическими критериями первичного и вторичного СШ. 2. При беременности исследование сывороточного уровня антител к SS-B/La -48 kDa полезно для прогнозирования риска развития полной поперечной блокады сердца у плода. 3. При СШ обнаружение антител к SS-B/La ассоциируется с выраженной лимфоидной инфильтрацией слюнных желез и развитием экстрагландулярных проявлений (пурпура, васкулит, лимфаденопатия). Кратность определения: Рекомендуемая частота определения антител к SS-B/La составляет 1 раз в 3 месяца.

5 Клиническая информативность определения антител к SS-B/La при СШ (ИФА) ПоказательСобственные данныеДанные литературы 1 ДЧ (%) ДС (%) ОППР ОПОР ,6 0, ,3 1.Reveille JD, Solomon DH, Schur PH, Kavanaugh AEvidence based guidelines for the use of immunologic laboratory tests: Anti-Ro (SS-A) and La (SS-B) Arthritis Care Res. 2013;in press

6 Клиническая информативность определения антител к SS-B/La при СКВ (ИФА) ПоказательСобственные данныеДанные литературы 1 ДЧ (%) ДС (%) ОППР ОПОР ,3 0, ,8 1.Reveille JD, Solomon DH, Schur PH, Kavanaugh AEvidence based guidelines for the use of immunologic laboratory tests: Anti-Ro (SS-A) and La (SS-B) Arthritis Care Res. 2013;in press

7 Антитела к U1РНП Реагируют с белковыми компонентами (70 kDa, A и C) U1 малого ядерного рибонуклеопротеина (U1 мяРНП). Методы определения: ИФА, ИБ, ДИД и КИЭФ. Норма: 25 ЕД /мл при использовании ИФА (зависит от рекомендаций фирмы- изготовителя коммерческих наборов реагентов). Клиническое значение: 1. Выявление антител к U1РНП в высоких титрах полезно для диагностики СЗСТ (ДЧ: %, ДС- 98%). 2. Менее полезный маркер для диагностики СКВ. 3. Полезный маркер для прогнозирования неблагоприятного течения СКВ с развитием синдрома Рейно и тяжелого поражения внутренних органов. Кратность определения: Рекомендуемая частота определения антител к U1РНП составляет 1 раз в 3 месяца.

8 Клиническая информативность определения антител к U1РНП при СКВ (ИФА) ПоказательСобственные данныеДанные литературы 1,2 ДЧ (%) ДС (%) ОППР ОПОР ,7 1, нд 1.Craft J. Rheum Dis Clin North Am 1992;18: Migliorini P. et al. Autoimmunity;38:47-54

9 Склеродермические антитела Тип антителМетод определения Клиническое значение Антицентромерные антитела НРИФ ВГН

10 Клиническая информативность определения антицентромерных антител при ССД (НРИФ) ПоказательСобственные данныеДанные литературы 1 ДЧ (%) ДС (%) ОППР ОПОР ,0 0, , ,7-0,8 1.Reveille J.D.,Solomon D.H. Evidence-based guidelines for the use of immunologic tests: anticentromere, Scl-70, and nucleolar antibodies. Arthr Rheum 2003; 49:

11 Клиническая информативность определения антител к Scl-70 при ССД (ИФА) ПоказательСобственные данныеДанные литературы 1 ДЧ (%) ДС (%) ОППР ОПОР 21 96,5 6,0 0, ,6-1,5 1.Reveille J.D.,Solomon D.H. Evidence-based guidelines for the use of immunologic tests: anticentromere, Scl-70, and nucleolar antibodies. Arthr Rheum 2003; 49:

12 МИОЗИТ-СПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА Тип антителМетод определения Клиническое значение Jo-1ДИД, ИП, ИФА, ИБ Диагностический критерий ПМ/ДМ с антисинтетазным синдромом (острый миозит, интерстициальное поражение легких, лихорадка, артрит, синдром Рейно, рука механика ) SRPДИД, ИП, ИБ Диагностика ПМ, ассоциирующегося с острым началом заболевания, тяжелым течением миозита, кардиомиопатией и плохим ответом на глюкокортикоидную терапию Mi-2ДИД, ИП, ИФА, ИБ Диагностика классического стероидчувствительного ДМ с благоприятным прогнозом и редким развитием опухолевого миозита PM-SclДИД, ИП, ИФА, ИБ Диагностика субтипа ДБСТ, включающего признаки ССД, ПМ и поражение почек. KJДИД, ИП, ИБ Диагностика миозита с синдромом Рейно и интерстициальным поражением легких Рекомендуется однократное определение. Высокая специфичность, но низкая чувствительность для диагностики ПМ/ДМ. Частота обнаружения при ДМ/ПМ составляет 1- 40%.

13 Клиническая информативность определения антител к Jo-1 при ПМ/ДМ (ИФА) ПоказательСобственные данныеДанные литературы 1-3 ДЧ (%) ДС (%) ОППР ОПОР ,7 1, ,75 0,8 1.Hirakata M. Internal Medicine 2005;44: Hengstmann G.J.D. et al. J Neurol 2005; 252: Hengstmann G.J.D. et al. Curr Opin Rheumatol 2004; 16:

14 Ревматоидные факторы (РФ) - аутоантитела IgM, IgA и IgG классов, реагирующие с Fc-фрагментом IgG Наибольшее значение в клинической практике имеет определение IgM РФ Методы определения: реакция агглютинации сенсибилизированных IgG частиц латекса (латекс-тест) или эритроцитов барана (реакция Ваалер- Розе), иммунонефелометрия и ИФА. В качестве скринингового теста может использоваться полуколичественный иммунохроматографический экспресс-метод измерения IgM РФ в цельной крови с помощью сухих тест-полосок. Рекомендуются количественные методы измерения IgM РФ в международных единицах (МЕ/мл) в сыворотке крови (иммунонефелометрия, ИФА). Положительные результаты определения IgM РФ полуколичественными методами (латекс-агглютинация), даже в высоких титрах, всегда должны рассматриваться как низко положительные. Нормальный уровень IgM РФ при тестировании сывороток с помощью латекс-агглютинации составляет 1:40, нефелометрии 15 МЕ/мл, ИФА 20 МЕ/мл. Рекомендуется выделение негативных (меньших или равных верхней границе нормы – ВГН); низко позитивных (3 ВГН) и высоко позитивных (>3 ВГН) уровней IgM РФ.

15 Положительные результаты обнаружения IgM РФ в сыворотке крови служат диагностическим критерием РА IgM РФ – чувствительный, но недостаточно специфичный маркер для диагностики РА, так как обнаруживается в сыворотках при других РЗ, хронических инфекциях, злокачественных новообразованиях и в пожилом возрасте IgM РФ в высокой концентрации является полезным маркером для прогнозирования быстропрогрессирующего деструктивного поражения суставов и системных проявлений при РА Тестирование IgM РФ позволяет прогнозировать эффективность терапии ГИБП у больных РА. Серопозитивность по IgM РФ и высокий уровень этого маркера в крови до начала лечения рассматривается в качестве предиктора хорошего ответа на терапию ритуксимабом при РА Клиническое значение IgM РФ

16 Клиническая информативность определения IgM РФ при РА (иммунонефелометрия) ПоказательСобственные данныеДанные литературы 1,2 ДЧ (%) ДС (%) ОППР ОПОР ,2 0, ,86 0,38 1.Taylor P. et al. A systematic review of serum biomarkers anti-cyclic citrullinated peptide and rheumatoid factor as tests for rheumatoid arthritis. Autoimmune. Dis. 2011; 2011: Nishimura K. et al. Meta-analysis: diagnostic accuracy of anti-cyclic citrullinated peptide antibody and rheumatoid factor for rheumatoid arthritis. Ann Intern Med 2007; 146:

17 Кратность определения РФ при РА У серонегативных по IgM РФ пациентов на ранней стадии РА рекомендуемая кратность определения данного показателя составляет 1 раз в месяцев, на развернутой стадии – 1 раз в год, на поздней стадии – повторный анализ IgM РФ проводить нецелесообразно. У низко/высоко позитивных больных по IgM РФ кратность его определения должна составлять на ранней стадии 1 раз в 3 месяца, на развернутой стадии – 1 раз в 3-6 месяцев, на поздней стадии – 1 раз в год.

18 Гетерогенная группа аутоантител, которые распознают антигенные детерминанты филлагрина и других белков, содержащих атипичную аминокислоту цитруллин, образующуюся в результате посттрансляционной модификации остатков аргинина под действием фермента пептидиларгининдеиминазы. Семейство АЦБ включает : антитела к циклическому цитруллинированному пептиду (АЦЦП) антиперинуклеарный фактор антикератиновые антитела антифиллагриновые антитела антитела к цитруллинированному фибриногену антитела к модифицированному цитруллинированному виментину (АМЦВ) АЦБ обладают высокой ДС при РА. Среди АЦБ наиболее стандартизованным маркером для ранней диагностики и оценки прогноза РА являются АЦЦП. Антитела к цитруллинированным белкам (АЦБ)

19 Стандартные методы определения АЦЦП в сыворотке крови: ИФА с использованием в качестве антигена синтетических циклических цитруллинированных пептидов второго и третьего поколения (АЦЦП 2 и АЦЦП 3 ) хемилюминисцентный и электрохемилюминисцентный анализ полуколичественный иммунохроматографический экспресс-метод в качестве скринингового теста ВГН при определении АЦЦП в сыворотке крови составляет 5-25 ЕД /мл в зависимости от фирмы-изготовителя коммерческих наборов реагентов. Рекомендуется выделение негативных (ВГН); низко позитивных (3 ВГН) и высоко позитивных (>3 ВГН) уровней АЦЦП. Методы определения АЦЦП

20 Положительные результаты обнаружения АЦЦП в сыворотке крови служат диагностическим критерием РА. АЦЦП – более высокоспецифичный диагностический маркер РА, особенно, на ранней стадии болезни по сравнению с IgМ РФ. Определение АЦЦП имеет важное значение для диагностики серонегативного по IgМ РФ РА (частота обнаружения АЦЦП у IgМ РФ-отрицательных больных РА составляет 20-40%), дифференциальной диагностики РА с другими РЗ. Серопозитивность по АЦЦП является прогностическим маркером тяжелого эрозивного поражения суставов при РА. Прогностическая ценность АЦЦП в отношении развития выраженной суставной деструкции у больных РА значительно возрастает при совместном определении данного маркера c shared epitope (SE) HLA DRB1*0101, 0104, Клиническое значение определения АЦЦП (I)

21 Клиническое значение определения АЦЦП (II) Обнаружение АЦЦП в сыворотке крови служит предиктором развития РА у здоровых лиц (ОР:15,9) и у пациентов с ранним недифференцированным артритом (ОР: 25-37,8). Тестирование АЦЦП позволяет прогнозировать эффективность терапии ГИБП у больных РА. Серопозитивность по АЦЦП и высокий уровень этого маркера в крови до начала лечения рассматривается в качестве предиктора хорошего ответа на терапию ритуксимабом и метотрексатом при РА.

22 Клиническая информативность определения АЦЦП при РА (ИФА) ПоказательСобственные данныеДанные литературы 1,2 ДЧ (%) ДС (%) ОППР ОПОР ,5 0, ,46-17,3 0,36-0,2 1. Taylor P. et al. A systematic review of serum biomarkers anti-cyclic citrullinated peptide and rheumatoid factor as tests for rheumatoid arthritis. Autoimmune. Dis. 2011; 2011: Nishimura K. et al. Meta-analysis: diagnostic accuracy of anti-cyclic citrullinated peptide antibody and rheumatoid factor for rheumatoid arthritis. Ann Intern Med 2007; 146:

23 На поздней стадии РА исследование АЦЦП нецелесообразно. У серонегативных по АЦЦП пациентов рекомендуемая кратность определения АЦЦП на ранней стадии РА составляет 1 раз в 6 месяцев, на развернутой стадии – однократно. У АЦЦП-низко позитивных больных исследование АЦЦП на ранней стадии РА следует проводить 1 раз в 3-6 месяцев, на развернутой стадии – 1 раз в год. При высокой позитивности по АЦЦП на ранней и развернутой стадиях РА рекомендуется однократное исследование АЦЦП. Кратность определения АЦЦП при РА

24 Антитела к модифицированному цитруллинированному виментину (АМЦВ) виментин Feist. Current perspectives and innovation in autoantibody testing in rheumatoid arthritis. Berlin, 2008 хрящ кость Костная резорбция паннус Синовиальная жидкость АМЦВ макрофаг Плазм.клетка B-клетка Т-клетка Дендр. кл. ФНО-а ИЛ

25 Стандартным методом определения АМЦВ в сыворотке крови является ИФА. В качестве скринингового теста применяется полуколичественный иммунохроматографический экспресс-метод на сухих тест-полосках для измерения АМЦВ в цельной крови. Верхняя граница нормы при определении АМЦВ с помощью ИФА составляет 20 ЕД /мл. Рекомендуется выделение негативных (ВГН); низко позитивных (3 ВГН) и высоко позитивных (>3 ВГН) уровней АМЦВ. Методы определения АМЦВ

26 КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ АМЦВ Положительные результаты определения АМЦВ в сыворотке крови могут служить дополнительным диагностическим маркером РА при отрицательных результатах определения РФ и АЦЦП в сыворотке крови. АМЦВ обладают более высокой или сходной ДЧ, но меньшей ДС для диагностики РА по сравнению с АЦЦП ; Полезный маркер для прогнозирования тяжелого эрозивного поражения суставов у больных РА (ОР: 7,3). Повышение уровня АМЦВ в большей степени ассоциируется с клинико-лабораторными показателями воспалительной активности РА, чем АЦЦП.

27 Клиническая информативность определения АМЦВ при РА (ИФА) ПоказательСобственные данныеДанные литературы 1,2 ДЧ (%) ДС (%) ОППР ОПОР ,4 0, ,24 0,28 1. Luime J.J. et al. Ann Rheum Dis 2010;69: Qin X., Deng Y., Xu J. et al. Rheumatol Int 2011;31:

28 Кратность определения АМЦВ при РА На поздней стадии РА исследование АМЦВ нецелесообразно. у серонегативных по АЦЦП пациентов рекомендуемая кратность определения АМЦВ на ранней стадии РА составляет 1 раз в 6 месяцев, на развернутой стадии – однократно. У низко/высоко позитивных больных по АМЦВ исследование АМЦВ на ранней стадии РА следует проводить 1 раз в 3-6 месяцев, на развернутой стадии – 1 раз в 6 месяцев – 1 год.

29 АНТИНЕЙТРОФИЛЬНЫЕ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА (АНЦА) ГЕТЕРОГЕННАЯ ПОПУЛЯЦИЯ АУТОАНТИТЕЛ, РЕАГИРУЮЩИХ С ФЕРМЕНТАМИ ЦИТОПЛАЗМЫ НЕЙТРОФИЛОВ цАНЦА РЕАГИРУЮТ С ПРОТЕИНАЗОЙ 3 пАНЦА РЕАГИРУЮТ С МИЕЛОПЕРОКСИДАЗОЙ НРИФ с использованием фиксированных этанолом нейтрофилов ПЕРВИЧНЫЙ СКРИНИНГОВЫЙ ТЕСТ цAНЦА пАНЦА aАНЦА диффузный цитоплазматический гранулярный тип свечения с большей интенсивностью по направлению к ядру нейтрофилов, чем к периферии Перинуклеарный цитоплазматический тип свечения гомогенный диффузный цитоплазматический тип свечения с окрашиванием перинуклеарной зоны нейтрофилов и моноцитов норма < 1:16 – 1:20 ПОДТВЕРЖДАЮЩИЙ ТЕСТ Определение антител к ПР3 и МПО с помощью ИФА. Нормальный уровень цАНЦА и пАНЦА в сыворотке крови при использовании ИФА составляет менее 5,0-20,0 ЕД/мл (в зависимости от фирмы- изготовителя коммерческих наборов реагентов).

30 Обнаружение цАНЦА методом НРИФ является высокоспецифичным диагностическим маркером гранулематоза с полиангиитом (ГПА); менее полезно для диагностики микроскопического полиангиита (МПА) и синдрома Черджа – Строс. Положительные результаты определения пАНЦА методом НРИФ в сочетании с ИФА МПО-АНЦА служат полезным диагностическим маркером МПА, синдрома Черджа – Строс, а также быстропрогрессирующего гломерулонефрита и идиопатического альвеолярного геморрагического синдрома. ДЧ АНЦА варьирует от 34% до 92% в зависимости от активности, формы, стадии заболевания, распространенности патологического процесса и проводимой терапии. Отсутствие АНЦА при узелковом полиартериите позволяет дифференцировать данную форму васкулита от МПА. Повышение уровня цАНЦА/ПР3-АНЦА является фактором риска развития обострений ГПА на фоне ремиссии болезни. Клиническое значение АНЦА