МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования. - презентация

1 МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования «СИБИРСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт фундаментальной биологии и биотехнологии Кафедра биофизики ОТЧЕТ О НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ ПРАКТИКЕ Определение специфичности аптамеров к структурам, составляющим гематоэнцефалический барьер мозга мыши (название темы практики) Направление «Физика» Магистерская программа «Биофизика» / Окружающая среда и человек: основы контроля и надзора Магистрант БФ12-02М Зубкова О. А Руководитель д. б. н., профессор Замай Т. Н. Красноярск 2013

2 Определить специфичность аптамеров, полученных в результате селекции in vivo, к структурам ГЭБ. определить аффинность аптамеров к клеткам головного мозга мыши методом проточной цитометрии; получить культуры дифференцированных нейрональных мышиных клеток, а также культуры нейросфер; определить специфичность аптамеров к клеточным культурам с помощью флуоресцентной микроскопии.

3 1. Определение аффинности аптамеров методом проточной цитометрии Рисунок 1 - Анализ аффинности пулов аптамеров разных раундов селекции к клеткам желудочков, мозжечка и коры головного мозга мышей с помощью проточной цитометрии (FC 500 (Beckman Coulter, USA)) мозжечок желудочек кора

4 2. Получение культур дифференцированных нейрональных клеток и нейросфер мыши А, Б – культуры дифференцированных нейрональных клеток; В – культура нейросфер Рисунок 2 – Клеточные культуры (Микроскоп инвертированный Olympus IX 51S8F-3) А Б В

5 3. Определение специфичности аптамеров к клеточным культурам методом флуоресцентной микроскопии Микроскопия в световом полеФлуоресцентная микроскопия Дифференцированные клетки. Контроль Дифференцированные клетки + пул аптамеров 7 раунда

6 3. Определение специфичности аптамеров к клеточным культурам методом флуоресцентной микроскопии Микроскопия в световом полеФлуоресцентная микроскопия Нейросферы. Контроль Нейросферы + пул аптамеров 7 раунда

7 3. Определение специфичности аптамеров к клеточным культурам методом флуоресцентной микроскопии Микроскопия в световом полеФлуоресцентная микроскопия Форменные элементы крови мыши + пул аптамеров 7 раунда Фибробласты мыши + пул аптамеров 7 раунда

8 определена аффинность пулов аптамеров к клеткам коры, желудочков и мозжечка мыши методом проточной цитометрии. Наибольшим сродством к клеткам всех вышеперечисленных отделов мозга мыши обладает пул аптамеров 7 раунда селекции; получены культуры дифференцированных клеток нейрональной природы и культуры нейросфер мыши; определена специфичность пула аптамеров 7 раунда селекции к дифференцированным нейрональным клеткам и нейросферам мыши методом флуоресцентной микроскопии.