Разработка иммуноаналитических систем для определения ЛФ в сыворотке человека. - презентация

1 Разработка иммуноаналитических систем для определения ЛФ в сыворотке человека.

2 НИИ Биоорганической химии СО РАН Лаборатория нуклеиновых кислот. Мануйлов Н.Л. с.н.с. к.б.н. Лактионов П.П.

3 Цель Работы: Освоить основные биохимические методы. Освоить иммунохимические методы и различные типы иммуноанализа. Разработать способ точного определения ЛФ в сыворотке человека.

4 Характеристика ЛФ Белок м.r.78 кДа. Белок острой фазы. Выявлен в секретах экзокринных желёз, и вторичных гранулах нейтрофилов. Высвобождается из секреторных гранул нейтрофилов после стимуляции патогенными микроорганизмами Способен обратимо связывать ионы Fe, и тем самым подавлять рост микроорганизмов и опухолей.

5 Характеристика ЛФ ЛФ участвует в неспецифической иммунной защите, является фактором созревания и активатором клеток лимфоидного ряда Является внеклеточным транскрипционным фактором. Способен регулировать выделение ФНО, интерлейкинов 1 и 6 и усиливать фагоцитоз. Играет важную роль в нарушениях метаболизма железа при воспалении.

6 Применение в клинике. 1 Уточнение степени активности патологического процесса и оценка эффективности противовоспалительной терапии. 2 Оценка тяжести инфекционного поражения и прогнозирование развития послеродовых гнойно- септических осложнений как до их клинической манифестации, так и в ходе развития процесса. 3 Оценка состояния иммунной системы для назначения соответствующих иммуномодуляторов при инфекционных, аутоиммуных и других заболеваниях.

7 Применение в клинике 4 Диагностика и мониторинг злокачественных новообразований (лимфогранулематоз, лимфо- саркома, лейкозы, рак молочной железы, яичников, пищевода, желудка, кишечника). 5 Дифференциальная диагностика рака простаты. 6 Оценка эффективности хирургического лечения или химиотерапии, выявление рецидивов опухолей.

8 Имммунохимический спот анализ конъюгата АТ с пероксидазой хрена 1:1001:5001:25001:50001:10000К

9 лактоферрин пероксидаза хрена Механизм сэндвич иммуноанализа.

10 Калибровочная кривая

11 Характеристики системы Чувствительность -15 нг./мл. Точность-10-12% Диапазон определения нг./мл. Специфичность-высокая.

12 ЛактоферринПерксидаза хрена Механизм конкурентного иммуноанализа.

13 Калибровочная кривая

14 Характеристика системы Чувствительность 30нг./мл. Диапазон определения нг./мл. Точность 10-12% Специфичность-высокая

15 Результаты Выделен и очищен иммунологически активный препарат ЛФ. Проиммунизированны животные и получены антисыворотки к ЛФ. Приготовлен аффинный сорбент с ЛФ и выделены АТ к ЛФ. Приготовлен конъюгат АТ против ЛФ и пероксидазы хрена. Отработаны и оптимизированны иммуноаналитические системы для определения ЛФ.

16