Исследование Ретинальных Липофусциновых Гранул Методами Атомно-силовой И Ближнепольной Скарирующей Микроскопии А. А. Астафьев Московский-Физико Технический. - презентация

1 Исследование Ретинальных Липофусциновых Гранул Методами Атомно-силовой И Ближнепольной Скарирующей Микроскопии А. А. Астафьев Московский-Физико Технический Институт А. Н. Петрухин Институт Химической Физики им. Н.С. Семёнова

2 Обьект исследования – липофусциновые гранулы из глаза человека Липофусциновые гранулы – белково-липидные образования микронного размера. Под действием синего света образуют активные формы кислорода, разрушающие зрительные рецепторы

3 Под действием синего света гранулы флуоресцируют в жёлтой части спектра Наиболее известным из флуорофоров является так называемый А2Е, обладающий фототоксическими свойствами, спектр флуоресценции которого в основном совпадает со спектром флуоресценции липофусцина. A2E

4 Изображения гранулы, полученные атомно-силовым микроскопом

5 Схема эксперимента по наблюдению флуоресценции

6 Использовалось две методики: 1.Образец освещается через зонд, флуоресценция собирается объективом (режим освещения) Достоинства: простота Недостатки: сильный фоновый сигнал из-за флуоресценции волокна. Сложные юстировки. 2.Образец освещается через обьектив, флуоресценция собирается зондом (режим сбора) Достоинства: Можно избавится от фонового сигнала. Облегчаются юстировки. Недостатки: сигнал флуоресценции слабее

7 12 3

8 Сравнение спектров флуоресценции тестового образца, полученных при сборе через объектив и через апертуру зонда

9 Сравнение спектров флуоресценции на вершине и у подножия скопления липофусцина

10 Нахождние спектра флуоресценции отдельной гранулы

11 Сравнение спектров флуоресценции, полученных в различных точках гранулы

12 Фотовыцветание гранул под действием зелёного света

13 Выводы: 1.Исследована структура липофусциновых гранул 2.Получен спектр флуоресценции с липофусцинового скопления. Проведенно сравнение спектров, полученных в режиме сбора и в режиме освещения. 3.Получен спектр флуоресценции одиночной гранулы. 4.Наблюдалось фотовыцветание гранул под действием интенсивного света. Дальнейшие планы: С помощью карты флуоресценции исследовать распределение флуорофоров в единичной грануле