Вирусы гепатита человека. Гепатиты Известные вирусы гепатита человека. - презентация

1 Вирусы гепатита человека

2 Гепатиты Известные вирусы гепатита человека

3 Гепатиты Вирус гепатита A (ВГA, HAV) Семейство Picornaviridae Род Hepatovirus

4 Гепатиты Безоболочечный Диаметр вириона 27нм Капсид икосаэдрической симметрии (60 субъединиц, каждая состоит из 5 протомеров) Протомер состоит из 4 полипептидов Геном: однонитевая +РНК Стерилизация: автоклавирование (120 о С) 20 мин., сухой жар – 1 час. Свойства

5 Вирус гепатита A (ВГA, HAV) Вирус гепатита A (ВГA, HAV) VP1 – прикрепительная структура вириона, отвечающая за связывание с рецептором чувствительной клетки. Рецептором является а 2 -макроглобулин клеток печени. На 5` конце вирусного генома находится геномный белок (VPg) В природе существует один серотип ВГА. Гепатиты

6 Вирус проникает в клетку путём виропексиса На рибосомах происходит трансляция вирусного генома и образование полипептида-предшественника, который нарезается на вирусные белки среди которых находится РНК-зависимая РНК-полимераза (транскриптаза) С помощью этого фермента образуется минус копия генома Она служит матрицей для синтеза плюс цепей – точных копий вирусного генома и целого ряда м-РНК, которые служат матрицей для синтеза клеткой вирусных белков Репликация вируса гепатита A

7 Гепатиты Вирус локализуется в цитоплазме гепатоцитов, дает прямой цитогенный эффект, но без острой деструкции клеток. Репликация вируса в гепатоцитах приводит к нарушению клеточного метаболизма, усилению перекисного окисления липидов, повышению проницаемости клеточных мембран, повреждению лизосом, нарушению энергетического обмена. Вышеперечисленные признаки клеточных изменений являются признаками усиленного апоптоза в гепатоцитах. Патогенез многих болезней человека связан с неспособностью клеток подвергаться апоптозу. Смерть клетки может играть биологически полезную роль в элиминации тех клеток, выживание которых вредно для организма в целом, например, клеток, пораженных вирусом. Как правило, течение гепатита А благоприятное, а организм проводит адекватное уничтожение инфицированных гепатоцитов. Вирус гепатита A (ВГA, HAV)

8 Эпидемиология Источник инфекции – больные острой формой ( главным образом, с безжелтушными вариантами болезни) Механизм передачи – фекально-оральный, главный путь передачи – водный. Инкубационный период дней. Клиническое течение легкое. У большинства заболевших имеются лишь неспецифические симптомы: незначительное повышение температуры тела, слабость, головная боль, боль в животе, диарея. у детей до 5 лет (80%) – асимптоматическое. У взрослых клинические признаки наблюдаются у 50-80% инфицированных. Молниеносные формы составляют от 0,04 до 0,1%, среди пожилых на фоне предшествующих хронических заболеваний печени. Хронизации нет. Гепатиты

9 Лечение и профилактика Специфического лечения не существует. Пассивная иммунопрофилактика целесообразна у лиц, направляющихся в эндемичные регионы на короткий срок. Осуществляется экстренная профилактика при неблагоприятной эпидемиологической обстановке. Длительность защиты при использовании человеческого иммуноглобулина в дозе 0,02 мл на 1 кг массы тела около 3 месяцев с эффективностью 86%. Гепатиты

10 Лечение и профилактика Активная иммунизация осуществляется для групп повышенного риска: путешествующие в эндемичные регионы, воинские контингенты, воспитатели детских учреждений, медицинские работники, работники в сфере питания. Разработаны инактивированная, аттенуированная и рекомбинантная вакцины. В настоящее время в Российской Федерации зарегистрированы следующие вакцины против гепатита А: ГЕП-А-ин-ВАК,Россия; ГЕП-А-ин-ВАК-ПОЛ,Россия; Аваксим фирмы «Авентис Пастер», Франция; Вакта(25,50 Ед.) фирмы «Мерк, Шарп и Доум», США; Хаврикс(720,1440) фирмы «ГлаксоСмитКляйн», Великобритания. Гепатиты

11 Лечение и профилактика Инактивированная формальдегидом вакцина готовится из вирусов, культивируемых на культуре диплоидных клеток человека. Курс вакцинации состоит из введения двух доз с интервалом от 6 до 12 месяцев. После введения первой дозы препарата защитный титр нейтрализующих антител вырабатывается не ранее чем через 2 недели с регистрацией почти у 100% привитых спустя месяц. Длительность поствакцинального периода после введения бустерной дозы – более 15 лет. Вакцина против гепатита А разрешена к применению у детей с 2-летнего возраста. Можно сочетать с прививкой против менингококковой инфекции. При неблагоприятной эпидемиологической ситуации разрешается прививать детей старше года. Гепатиты

12 Маркеры ГА Гепатиты

13 Диагностика Определение ранних антител (IgM) в сыворотке больного методом ИФА. Возможна иммуноэлектронная микроскопия для выявления вируса в фекалиях в инкубационном и раннем периодах заболевания. Гепатиты

14 Вирус гепатита B (ВГB, HBV) Семейство Hepadnaviridae Род Orthohepadnavirus Вирион ВГВ (частица Дейна) – сферической формы, диаметром 42нм. Имеет сердцевину (ядро, core) 27нм. и поверхностную оболочку (суперкапсид). Сердцевина состоит из капсида с кубическим типом симметрии, образованного 180 капсомерами, в который заключен уникальный геном вируса. Поверх сердцевины расположена липидсодержащая оболочка – суперкапсид, в состав которого входят гликопротеины вируса.

15 Гепатиты Вирус гепатита B (ВГB, HBV) Семейство Hepadnaviridae Род Orthohepadnavirus Геном вируса представлен кольцевой двухцепочечной молекулой ДНК с коротким одноцепочечным участком (минус-цепь - полная, плюс-цепь – неполная, составляет примерно 2/3). В состав генома входят 2 вирусных фермента – ВГВ-полимераза, обладающая активностями ДНК- полимеразы, обратной транскриптазы, РНК-азы и протеинкиназа.

16 Гепатиты Вирус гепатита B (ВГB, HBV)

17 Антигены ВГВ HBs – поверхностных антигенов ВГВ (surface) три: HBs-S (small) – главный антиген оболочки вируса(70%), имеет значение для сборки вириона, определяется в крови HBs-M (middle) – функция неизвестна, и HBs-L (large) – содержит полный HBs-S плюс дополнительную аминокислотную последовательность на N конце, отвечает за связывание с рецептором, присутствуют только в составе вириона. HBс – главный антиген (белок) нуклеокапсида. В кровь не секретируется, в свободном виде не определяется. «Core, ядерный» антиген. HBe – образуется в результате протеолиза «корового» антигена, выделяется в кровь где и может быть обнаружен HBx – неструктурный белок-трансактиватор, повышающий уровень репликации вируса. Гепатиты

18 Антигены ВГВ

19 Гепатиты Двунитевая ДНК вируса в ядре образует комплекс с гистонами клетки-хозина В таком виде транскрибируется клеточной РНК-полимеразой в м-РНК Образуется шесть м-РНК Одна – полная копия – будет работать матрицей для вирусного генома; длиннее генома, имеет повторяющиеся последовательности на обоих концах (как ретровирусы) Остальные пять кодируют HBs-S, HBs-M, HBs-L, HВe, HBx В цитоплазме полная копия м-РНК заключается в капсид Внутри капсида обратная транскриптаза синтезирует на этой матрице минус -цепь ДНК Взаимодействие гепатита B с клеткой

20 Гепатиты HBV не обладает прямым цитопатогенным эффектом инфицированные гепатоциты атакуются и разрушаются в ходе защитных иммунологических реакций. клинический исход зависит от иммунной системы хозяина заражение вирусом провоцирует целый комплекс ответных иммунологических реакций хозяина антитела связываются с вирусными белками, в том числе белками оболочки, и способны элиминировать циркулирующие вирусные частицы разрешение острой инфекции связано с мощным, поликлональным, мультиспецифическим ответом CD4+ Т-клеток на антигены нуклеокапсида и CD8+ Т-клеток – на антигены оболочки, нуклеокапсида и полимеразы. HBsAg может быть опосредованно токсичен для гепатоцита, так как является сигналом, вызывающим агрессию цитотоксических Т- лимфоцитов по отношению к гепатоцитам цитотоксические Т-лимфоциты способствуют развитию разной скорости апоптоза в гепатоцитах, вплоть до молниеносного течения вирус при интеграции в геном хозяина, меняет программу клетки по самоуничтожению инфицированных клеток на противоположную подавление апоптоза способствует хронизации процесса с перспективой онкотрансформации Патогенез гепатита B

21 Маркеры ВГВ Гепатиты

22 Динамика лабораторных показателей при остром гепатите В

23 Гепатиты Формы хронического гепатита B

24 Лабораторная диагностика. С помощью ИФА определяют антигены и антитела в сыворотке крови обследуемых (серодиагностика). Серологические маркеры HBsAg - поверхностный Аг вируса Анти- HBs - антитела к поверхностному Аг HBeAg - ядерный Аг Анти-HBe антитела HBcAg – ядерный Аг Анти-HBc антитела Клиническое значение Указывает на инфицированность вирусом Указывают на защиту от инфекции Указывает на репликацию вируса в гепатоцитах и высокую инфицированность крови Указывают на начало стадии реконвалесценции Указывает на репликацию вируса вгепатоцитах. Обнаруживается только при исследовании биоптатов и при аутопсии. В крови в свободном состоянии не выявляется Важный диагностический маркер, особенно при отрицательных результатах выявления HBsAg

25 Гепатиты Иммунологические маркеры при ВГВ-инфекции

26 Лечение и профилактика СТРАТЕГИЯ НЕМЕДЛЕННОЙ ЗАЩИТЫ от ГЕПАТИТА В – ПАССИВНАЯ ЭКСТРЕННАЯ ПРОФИЛАКТИКА – ИММУНОГЛОБУЛИН. 1. Иммуноглобулин человека для внутривенного введения ГЕПАТЕКТ (антитела против вируса гепатита В 50МЕ) - невакцинированные и имевшие контакт с вирусом - вакцинированные и имевшие контакт с вирусом - дети, родившиеся от матерей с гепатитом В 2. Иммуноглобулин человека против гепатита В АНТИГЕП – содержит антитела к HBsAg. Для лечения используют интерфероны и индукторы ИФ, а также пэгилированные интерфероны. Ламивудин, аденовир (нуклеозидные аналоги, мишень - обратная транскриптаза) подавляет HBV-репликацию. Рибавирин (нуклеозидный аналог) обладает широким спектром активности: ингибирование ДНК- и РНК-полимераз, подавляет кэпирование вирусспецифических мРНК и др.

27 Активная профилактика Действующим началом всех вакцин является HBsAg, полученный на основе пекарских дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Вакцина содержит адъювант и стабилизатор, хранится при 2-8 о С, без замораживания. Схема иммунизации – 0,1,6 месяцев. Вакцинация: первая доза – в 4,5 мес вместе с АКДС-2 и ОПВ-2, вторая- в 6мес. Вместе с АКДС-3 и ОПВ-3, третья – в 12мес вместе с ЖКВ.

28 Профилактика В РФ зарегистрированы следующие вакцины против гепатита В: Рекомбинантная дрожжевая жидкая ЗАО «Научно- производственная компания «Комбиотех», Россия; Вакцина против гепатита В ДНК рекомбинантная фирмы ФГУП НПО «Вирион», Россия; Энджерикс В фирмы «ГлаксоСмитКляйн–Биомед», Россия; H-B-Vax R -II фирмы « Мерк,Шарп и Доум», США; Эбербиовак НВ фирмы « Эбер Биотек», Куба; Энджерикс В фирмы «ГлаксоСмитКляйн», Великобритания; Эувакс В фирмы «LG Кемикал Лтд», Южная Корея, под контролем фирмы «Авентис Пастер»; Шенвак-В фирмы «Шанта Биотекникс ПТВ Лтд», Индия; Бубо-М – дифтерийно-столбнячно-гепатитная В вакцина ЗАО «Научно-производственная компания «Комбиотех», Россия. Гепатиты

29 Вирус гепатита D (ВГD, HDV)

30 Гепатит Д HDV – это дефектная вирусная частица, неспособная к репликации в отсутствии HBV сферические частицы диаметром 36 нм Под наружной липидной оболочкой распложен нуклеокапсид, состоящий из циркулярной –РНК, ковалентно связанной с большим количеством копий HDAg РНК-геном (1700 нуклеотидов) кодирует единственный белок HDAg HDAg связан с вирусной РНК и важен для вирусной репликации и сборки HBV обеспечивает поверхностные белки HBs-S, HBs-M, HBs-L, необходимые для оболочки вируса 1 серотип, 3 генотипа. Гепатиты

31 Вирусный гепатит Д Встречается дельта-вирусный гепатит только у HBV- инфицированных Источник инфекции – больной острой или хронической формой инфекции, протекающей как манифестантно, так и субклинически. Наибольшее число инфицированных – среди наркоманов, больных гемофилией. Высокий риск заражения при гетеросексуальных контактах. Это острая коинфекция или суперинфекция (наслоение острого гепатита Д на хроническую HBV-инфекцию). Возможны печеночная недостаточность, хронический активный гепатит, цирроз. Летальность при суперинфекции достигает 5-20 %. Возможно формирование хронического гепатита. Серологические маркеры: Ат класса IgM к вирусу ГД указывают на репродукцию вируса в организме.

32 Лабораторная диагностика Серологическая диагностика: Выявление антител класса IgM к вирусу ГД, указывающих на репродукцию вируса в организме с использованием ИФА. Молекулярно-генетические методы: Выявление генома вируса с использованием ПЦР и молекулярной гибридизации.

33 Гепатиты Диаметр вириона 50 нм. Сложный, имеет суперкапсид. Геном – одноцепочечная плюс-РНК. Семейство Flaviviridae Род Hepacivirus Вирус гепатита C (ВГC, HCV)

34 Вирус гепатита С (ВГС, HCV) Е1(gp31) и Е2(gp70) гликопротеины обеспечивают связывание вируса с клеткой и проникновение в нее. С(core) белок капсида участвует в сборке вируса, регуляции синтеза вирусной РНК, возможно, в подавлении генной транскрипции в ядре. Гепатиты

35 NS2 И NS3 – ВИРУСНЫЕ ПРОТЕАЗЫ NS5 – РНК- ПОЛИМЕРАЗА Гепатиты Вирус гепатита C (ВГC, HCV)

36 Особенность ВГС – его генетическая неоднородность, которая соответствует высокой частоте спонтанных мутаций. На основании различий нуклеотидных последовательностей области NS5 выделяют 76 различных штаммов вируса. По различиям нуклеотидных последовательностей в области ядра вируса выделяют 6 основных генотипов и около 100 субтипов. В России чаще всего регистрируются генотипы 1б,1а,3а,2а. Гепатиты

37 Вирус гепатита C (ВГC, HCV) Течение болезни, ее исходы, эффективность лечения, а также диагностика и (в будущем) вакцинопрофилактика зависят от генотипа HCV.

38 Гепатиты Процесс репликации протекает с большим количеством «ошибок» Образуется большое число разных генотипов и субтипов В организме конкретного пациента вирус всегда присутствует в виде набора квазивидов В каждом квазивидовом наборе есть главный, преобладающий вариант Наиболее стабильны нетранслируемые 5' и 3- участки 5NTR и 3NTR. Наиболее изменчивы области кодирующие оболочечные белки Е1 и Е2 (антигенный дрейф). Это определяет длительную персистенцию вируса в организме. У вируса имеется также участок, состоящий из нуклеотидов, который определяется практически у всех типов вируса Именно этот участок используется в ПЦР для обнаружения РНК вируса гепатита С Репликация вируса гепатита С

39

40 Врожденные факторы защиты. Подавление цитотоксической активности NK клеток при хроническом ГС Обратимость этого процесса у пациентов, чувствительных к лечению ИФ NK-кпетки (оранжевые) атакуют клетки, инфицированные вирусами (розовые).

41 Статистика заболевания Инфицированные вирусом гепатита С Персистирующая инфекция Развивается серьезное хроническое поражение печени 85% 1-5% Болезнь протекает бессимптомно и большинство не подозревает о заболевании Смерть от цирроза или рака печени 30%

42 Гепатиты Инкубационный период при HCV-инфекции составляет 12 недель. Клиническая картина острой инфекции отличается малой выраженностью симптомов (у 85-90% - без желтухи). Переход в хроническую форму имеет место у 50-75% больных острым гепатитом. У 20-25% больных с хроническим гепатитом отмечено формирование цирроза печени с развитием в дальнейшем у 3-5% гепатоцеллюлярной карциномы. При генотипе 1б и 1а развитие цирроза происходит чаще. Клиническая картина хронического гепатита характеризуется как патологией печени, так и разнообразными внепеченочными поражениями (у40% больных) Среди этих проявлений – эндокринные (гипер- и гипотиреоз), гематологические (криоглобулинемия, В-лимфома), кожные (мультиформная и узловатая эритема. крапивница), суставные (артриты, артралгии), почечные (гломерулонефрит), аутоиммунные (легочный васкулит, аутоиммунный гепатит). Патогенез гепатита С

43 Гепатиты Патогенез гепатита С обусловлен прямым цитотоксическим эффектом ВГС и иммунопатологическими механизмами. ВГС нарушает течение внутриклеточных процессов. Белок капсида обнаруживается в ядре и способен угнетать генную транскрипцию. ВГС также, как и ВГВ подавляет способность клеток к апоптозу, что препятствует выведению вируса из организма. Генетическая неоднородность ВГС способствует переходу патологического процесса в хроническую форму. ВГС обладает тропизмом к гепатоцитам, лимфоцитам периферической крови, эпителиальным клеткам ЖКТ, клеткам нервной системы. Гликопротеин Е2 связывается с рецептором клеток СД81. Отсюда наличие внепеченочных резервуаров вируса. Патогенез гепатита С

44 Лечение и профилактика ЛЕЧЕНИЕ: интерфероны, индукторы интерферонов, химиопрепараты, иммуномодуляторы. Альфа-интерфероны « Интрон А» - рекомбинантный альфа-2в ИФ «Вэллферон» – природный человеческий лейкоцитарный ИФ. Пролонгированные альфа-ИФ(« ПЕГИНТРОН»,«ПЕГАСИС») Рибавирин, ацикловир (аналоги нуклеозидов) Сочетание альфа-ИФ и химиопрепаратов. Побочные явления терапии отмечаются у 20% больных хроническим ГС – анемия, тяжелая депрессия, острый психоз, диспептические явления, аллергические реакции и др. Гепатиты

45 Лечение и профилактика Индукторы интерферона: ЦИКЛОФЕРОН, НЕОВИР, АМИКСИН. Индуктор интерферона и иммуномодулятор ГЕПОН, ПОЛИОКСИДОНИЙ, ТИМОГЕН. ПЭГИНТРОН (пэгилированный интерферон альфа-2а) в комбинации с РЕБЕТОЛОМ (рибавирин)– успешно используют при лечении хронического гепатита С. Эффект терапии зависит от генотипа вируса: у больных со 2 и 3 генотипом HCV - болезнь считается курабельной, 1 генотип – трудно поддается лечению.

46 Профилактика Вакцины против ГС не разработаны, ведется поиск эффективных специфических иммуноглобулинов.

47 Лабораторная диагностика Серологический метод: Обнаружение антител против ВГС методом ИФА. Молекулярно-генетический метод: Выявление РНК ВГС в ОТ-ПЦР и в ПЦР в реальном времени с определением величины вирусной нагрузки и отдельных генотипов этого вируса. Вспомогательное значение имеет обнаружение повышения активности аминотрансфераз в 5-10 раз в крови заболевших Важную роль в диагностике хронического ГС играет гистологическое исследование биоптатов печени. Гепатиты

48 Гепатит С Гепатиты

49 Иммунитет Иммунитет после перенесенного заболевания не формируется? Иммунный ответ гуморальный и клеточный задерживается и не препятствует вирусемии. Инфекция может протекать без сероконверсии? Вирусспецифические антитела не предотвращают реинфекцию у человека и шимпанзе. Антитела нейтрализуют вирус in vitro, взаимодействуя с гликопротеином Е2.