Скачать презентацию
Идет загрузка презентации. Пожалуйста, подождите
2
Теоретические основы полимеразной цепной реакции
3
Механизм ПЦР основан на явлении обратимости тепловой денатурации ДНК
4
нагревание
5
нагревание
10
При охлаждении раствора денатурированной ДНК происходит её ренатурация - восстановление двухцепочечной структуры
11
охлаждение
18
Основные термины и понятия: 1. Праймер 2. Отжиг праймера (annealing) 3. Термостабильная ДНК-полимераза 4. Амплификация ДНК 5. Ампликон
19
ПЦР-цикл состоит из трёх шагов
20
95 C Шаг 1: денатурация ДНК
21
Шаг 1: денатурация ДНК
22
95 C Шаг 1: денатурация ДНК
23
40-50 C Шаг 2: отжиг праймеров
24
72 C Шаг 3: элонгация цепей
25
Шаг 3: элонгация цепей
26
72 C Шаг 3: элонгация цепей
27
72 C Шаг 3: элонгация цепей
28
72 C Шаг 3: элонгация цепей
29
72 C Шаг 3: элонгация цепей
30
72 C Шаг 3: элонгация цепей
31
72 C Шаг 3: элонгация цепей
32
72 C Шаг 3: элонгация цепей
33
72 C Шаг 3: элонгация цепей
34
72 C Шаг 3: элонгация цепей
35
72 C Шаг 3: элонгация цепей
36
72 C Шаг 3: элонгация цепей
37
В результате одного цикла число цепей удвоилось
38
В следующем цикле новосинтезированные цепи являются матрицами для синтеза новых цепей
40
95 C
43
40-50 C
44
72 C
57
Число копий вновь удвоилось
58
Число ПЦР-продуктов нарастает экспоненциально 1
59
2
60
4
61
8
62
16
63
Число ПЦР-продуктов нарастает экспоненциально 32
64
Число ПЦР-продуктов нарастает экспоненциально 64
65
Число ПЦР-продуктов нарастает экспоненциально 128
66
Число ПЦР-продуктов нарастает экспоненциально 256
67
Число ПЦР-продуктов нарастает экспоненциально 512
68
Число ПЦР-продуктов нарастает экспоненциально 1024
69
Число ПЦР-продуктов нарастает экспоненциально 2048
70
В результате 30 циклов получается около 2 30 копий или
71
Состав ПЦР-смеси: 1. ДНК-проба
72
Состав ПЦР-смеси: 1. ДНК-проба 2. Праймеры
73
Состав ПЦР-смеси: 1. ДНК-проба 2. Праймеры 3. Нуклеозид-3-фосфаты
74
Состав ПЦР-смеси: 1. ДНК-проба 2. Праймеры 4. Термостабильная ДНК-полимераза 3. Нуклеозид-3-фосфаты
75
Состав ПЦР-смеси: 1. ДНК-проба 2. Праймеры 4. Термостабильная ДНК-полимераза 5. Буфер для ПЦР 3. Нуклеозид-3-фосфаты
76
Состав ПЦР-смеси: 1. ДНК-проба 2. Праймеры 4. Термостабильная ДНК-полимераза 5. Буфер для ПЦР 3. Нуклеозид-3-фосфаты 6. Ионы Mg 2+
77
Определение результатов ПЦР
79
+ После электрофореза поместим гель на источник УФ-света
80
ампликоны
82
Kary B. Mullis
83
В 1993 г. за изобретение ПЦР Кэри Мюллису присуждена Нобелевская премия в области химии «за изобретение метода полимеразной цепной реакции»
84
Кэри Б. Мюллис НЕОБЫЧАЙНАЯ ИСТОРИЯ О ТОМ, КАК РОДИЛАСЬ ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ В мире науки (Scientific American) Июнь N г. или в Интернет
Еще похожие презентации в нашем архиве:
