Выполнила студентка 5 курса Рогачёва Дарья. ИКСИ (от англ. ICSI IntraCytoplasmic Sperm Injection, букв. введение сперматозоида в цитоплазму, интрацитоплазматическая. - презентация

1 Выполнила студентка 5 курса Рогачёва Дарья

2 ИКСИ (от англ. ICSI IntraCytoplasmic Sperm Injection, букв. введение сперматозоида в цитоплазму, интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида) метод лечения бесплодия, один из вспомогательных методов искусственного оплодотворения, при котором заранее отобранный жизнеспособный сперматозоид под микроскопом вводят в яйцеклетку «вручную» с помощью специальных микрохирургических инструментов.англ.сперматозоида бесплодия искусственного оплодотворения

3 В клинической практике метод ИКСИ впервые применен в 1992 году в Бельгии, в Центре репродуктивной медицины Брюссельского свободного университета под руководством профессора Андре Ван Стейртегемма.Бельгии Брюссельского свободного университета

4 По данным ИКСИ статистики, вероятность успешного оплодотворения после процедуры ИКСИ не превышает 60%. Связано это с тем, что в процессе подготовки и проведения ИКСИ яйцеклетку могут повредить, или же одна из клеток (мужская или женская) несет в себе генетические аномалии. Но если оплодотворение произошло, то с вероятностью 90-95% из новой клетки разовьется здоровый эмбрион. Беременность после ИКСИ наступает примерно в 25-30% – так же, как и при обычном ЭКО. Однако в отличие от ЭКО, ИКСИ беременность не нуждается в тщательном контроле. Тем не менее, ИКСИ оплодотворение проводится гораздо реже, по сравнению со стандартным ЭКО. Причин несколько: дорогое оборудование, которое есть не во всех клиниках, сложность самой процедуры и высокая квалификация эмбриолога, ее проводящего.

5 ЧЕМ ОТЛИЧАЕТСЯ ЭКО ОТ ИКСИ? Во время стандартного искусственного оплодотворения яйцеклетки и сперму помещают в чашку Петри с подготовленной средой, где сперматозоиды должны сами проникнуть в яйцеклетки. Если применяется интрацитоплазматическая инъекция требуется гораздо большее число манипуляций. Для оплодотворения отбираются самые жизнеспособные и здоровые сперматозоиды (в самых тяжелых случаях бесплодия хотя бы один) и с помощью микрохирургических инструментов под микроскопом в цитоплазму каждой яйцеклетки вводится сперматозоид. Перед этим яйцеклетки должны быть подготовлены с них специальным реактивом удаляется внешний слой клеток для оценки зрелости клетки и облегчения введения семенного материала. Через 16–18 часов оценивают успешность процедуры. После этого развитие зародыша не отличается от стандартного ЭКО: на несколько дней яйцеклетки помещают в инкубатор для созревания эмбрионов, а затем в количестве от 1 до 3 перемещают в матку женщины. Если после переноса остаются «лишние» яйцеклетки с эмбрионами, их замораживают в жидком азоте (криоконсервация) и хранятся в специальном банке на тот случай, если после первой попытки беременность развиваться не будет.криоконсервация

6 В КАКИХ СИТУАЦИЯХ ПОКАЗАНА ПРОЦЕДУРА ИКСИ? Термин Краткое пояснение Аспермия Отсутствие эякулята Олигозооспермия Снижение количества сперматозоидов в эякуляте (менее 20 миллионов в 1 миллилитре эякулята) Азооспермия Отсутствие в эякуляте сперматозоидов и незрелых клеток сперматогенеза Криптозооспермия Критически низкое количество сперматозоидов, тем не менее, способные к оплодотворению клетки в единичных количествах выявляются после центрифугирования спермы Астенозооспермия Отсутствие подвижности сперматозоида Тератозооспермия Грубые морфологические нарушения большинства сперматозоидов (неправильная форма головки или ее удвоении, утолщение, укорочение хвоста, отсутствие хромосомы и т.п.) АСАТСодержание антиспермальных антител в сперме

7 Единственный повод отказаться от ИКСИ – наличие обстоятельств, при которых беременность представляет собой серьезную угрозу для жизни матери и ее будущего ребенка. В их числе: соматические и психические расстройства; аномальное строение матки, при котором имплантация и развитие эмбриона просто невозможны; опухоли в матке или на яичниках; острые воспалительные процессы половых органов; наличие в организме злокачественных образований. Все эти проблемы касаются только женщины, противопоказаний к проведению ИКСИ со стороны ее супруга нет никаких.

8 ПЛЮСЫ И МИНУСЫ ИКСИ Интрацитоплазматическая инъекция гарантирует высокие шансы на успех – около 60%. Именно поэтому к ней прибегают, когда другие методики не дают никаких результатов. Она дает возможность забеременеть при самых неблагоприятных обстоятельствах: солидный возраст женщины (старше 39); получение малого количество пригодных яйцеклеток после стимуляции; проблемы со спермой у мужчины; наличие только крио консервированного генетического материала; неудачный опыт ЭКО. неудачный опыт ЭКО

9 Значительные материальные затраты – не единственный минус ИКСИ. Существуют некоторые генетические риски, о которых пару непременно должны предупредить заранее. Используя для оплодотворения генетический материал недостаточно высокого качества, который по тем или иным причинам не может соединиться сам по себе в естественных условиях, мы тем самым рискуем передать дефектные гены будущему потомству. Минимизировать риски ИКСИ позволяет генетический скрининг, которому поддаются яйцеклетка и сперматозоид, отобранные для оплодотворения. Еще один способ перестраховаться – предимплантационная диагностика уже зачатого эмбриона, которая даст возможность убедиться в отсутствии генных или хромосомных отклонений. Все эти усилия и предосторожности не лишни – благодаря им 95% эмбрионов, полученных методом ИКСИ, оказываются абсолютно здоровы и жизнеспособны.

10 1. Обследование мужчины и женщины, постановка диагноза. 2. Гормональная подготовка (ИКСИ выполняется после приема препаратов для стимуляции овуляции) 3. Получение ооцитов и семенного материала 4. Инъекция сперматозоида в яйцеклетку (непосредственно ИКСИ) 5. Перенос эмбрионов в полость матки женщины

11 Подготовка к ИКСИ женщине практически идентична подготовке к стандартному ЭКО. Она начинается с подробного обследования, которое включает консультации специалистов, УЗИ, анализы на гормоны, исследование мазков и прочие процедуры с целью исключения очагов инфекции. Кроме того, рекомендованы следующие меры:подготовке Подготовка к ИКСИ женщин старшего возраста (после 38 лет) начинается с оценки овариального резерва, то есть числа яйцеклеток, которые способны к оплодотворению. Это необходимо для правильного подбора гормональных препаратов и оценки возможности зачатия в принципе (если оно невозможно, пациентке предлагается воспользоваться донорскими ооцитами).донорскими ооцитами Минимизация рисков развития синдрома гиперстимуляции за счет употребления белковой пищи и большого количества воды (не менее 2,5 литров в день).синдрома гиперстимуляции Отказ от курения и алкоголя. Нормализация гормонального фона. Исключение значительных физических нагрузок. Женщины, не имеющие проблем половой сферы, ограничиваются перечисленными мерами. Если же у пациентки обнаружены эндометриоз, кисты в яичниках, миома, придется определенное время потратить на устранение этих проблем, поскольку они также способны стать препятствием для зачатия.эндометриоз

12 Пройти полное обследование, сдать спермограмму и анализы на инфекции, установить точную причину, которая препятствует зачатию.спермограмму Устранить инфекции и воспалительные заболевания, которые могут помешать зачатию – например, простатит. На качество спермы отрицательное влияние оказывают высокие температуры, поэтому в течение 1-2 месяцев до начала лечения нужно отказаться от посещения саун и бань. Негативное воздействие могут оказывать вирусные и бактериальные инфекции. ИКСИ проводится на фоне полного здоровья и не ранее чем через месяц после перенесенной инфекции. Стоит исключить курение, употребление алкоголя как минимум в течение месяца до начала процедуры. Пиво и вино увеличивают уровень эстрогенов, что тоже может уменьшить шансы на зачатие. Рекомендуется включить в рацион фрукты и овощи, содержащие аскорбиновую и фолиевую кислоты. Чтобы у врача была возможность получить большее количество сперматозоидов, рекомендовано не заниматься сексом на протяжении 3-5 дней до сдачи спермы

13 При необходимости, но, как правило, в соответствии с одной из разработанных схем, на 21-ый день предшествующего процедуре ИКСИ менструального цикла (при 28-дневном цикле) или на 23-й день (при 30-дневном цикле) назначается прием в течение 1,5 – 2-х недель или дольше одного из агонистов гонадотропин- рилизинг-гормона (Гн Рг). Это необходимо для угнетения самостоятельной активности яичников и повышения эффективности последующей их стимуляции. Возможны и другие схемы, но эта схема («длинная») наиболее часто используемая. О достаточности длительности приема препарата лечащий врач судит по данным мониторингового исследования уровня снижения содержания в крови эстрадиола и проведения УЗИ. После достижения необходимой степени угнетения функции яичников дозировка агониста Гн Рг снижается в 2 раза и начинается гиперстимуляция их функции в течение дней, что дает возможность увеличить в яичниках число фолликулов. В этих целях используются производные гонадотропных гормонов гипофиза («Гонал-Ф», «Менопур» или «Пуригон») в индивидуально подобранных дозах. От начала их введения ведется отсчет менструального цикла, в середине которого однократно назначается хорионический гонадотропин человека («Прегнил»), способствующий дозреванию фолликулов и подготовке их к пункции. Введение же производных гонадотропинов прекращается. Весь процесс лечения также осуществляется под контролем динамики УЗИ и результатов гормональных исследований.

14 Яйцеклетки получают из зрелых фолликулов через часов после введения хорионического гонадотропина. Процедура проводится под общим внутривенным наркозом и эхо графическим контролем. Она заключается в пункции специальной иглой заднего свода влагалища, затем далее стенки яичника в области фолликула. При затруднении пункции через влагалище, что может быть связано с какими-либо анатомическими особенностями, пункция фолликулов осуществляется лапароскопическим методом.пункция фолликулов После пункции фолликула производится аспирация фолликулярной жидкости вместе с ооцитом посредством вакуумного насоса. Длительность всей процедуры составляет от 15 до 40 минут. После забора ооцитов они отмываются в специальной среде и оцениваются специалистом-лаборантом на зрелость и качество. В этот же день женщине назначаются прогестероновые препараты («Дюфастон», «Утрожестан»), что позволяет поддержать функционирование желтого тела, нормализовать соотношение половых гормонов и подготовить эндометрий к имплантации эмбриона

15 Получение сперматозоидов осуществляется после 5 – 7-дневного полового воздержания в день забора яйцеклеток. Методика их получения может быть разной, в зависимости от имеющейся у мужчины патологии. При необходимости (обструктивная азооспермия) сперматозоиды могут быть получены с помощью пункции яичка или протока придатка яичка. Затем сперма разжижается, сперматозоиды отмываются от семенной жидкости и подготавливаются одним из физических методов фильтрацией, центрифугированием, флотацией или проточной цитометрией. Очень часто удается получить для проведения ИКСИ только единичные подвижные половые клетки, среди которых трудно осуществить надежный отбор. В этом случае применяются другие варианты методики очищения, концентрация спермы, инкубация половых клеток в питательной среде, стимуляция подвижности и т. д.

16 Она осуществляется посредством электрического или гидравлического микроманипулятора высокой точности, позволяющего осуществлять ручные манипуляции под микроскопом, и стеклянных инструментов инъекционной иглы-микропипетки и микроприсоски- капилляра. Принцип процедуры ИКСИ заключается, в отличие от классического ЭКО, в использовании не всех полученных сперматозоидов и нескольких яйцеклеток, а в отборе по морфологическим признакам созревшей и подготовленной яйцеклетки и единственного интенсивно активного (в плане поступательных движений) и полностью зрелого сперматозоида с нормальной или близкой к нормальной морфологической структурой. Такой сперматозоид искусственно вводится непосредственно в цитоплазму ооцита.

17 Для этого осуществляются следующие манипуляции по этапам: предварительно микроиглой отделяется хвостик от тела отобранного наиболее активного сперматозоида, который, таким образом, обездвиживается; лишение мужской половой клетки ее активности не вредит ей, но необходимо для предотвращения повреждения ооцита движущимся сперматозоидом; последний, но уже без хвостика, путем аспирации втягивается в просвет стеклянной иглы-микропипетки; ооцит фиксируется с помощью микроприсоски с одной стороны в положении «9-и часов»; иглой-микропипеткой со сперматозоидом прокалывается оболочка ооцита с противоположной стороны (в положении «3-х часов) под контролем частичной ее аспирации; сперматозоид из микроиглы аккуратно вводится в цитоплазму яйцеклетки; После такого оплодотворения ооциты отмываются и помещаются для дальнейшего культивирования (развития) в микрокапли специальной культуры (среды). Оболочка ооцита очень эластична и самостоятельно быстро закрывается, а такой прокол для клетки малотравматичен и не оказывает влияния на дальнейшее развитие эмбриона. Возможность повреждения яйцеклетки во время манипуляций составляет менее 1%.

18 Этот период составляет от 2-х до 5-и дней, считая первым днем следующий после оплодотворения. На IV этапе осуществляется инкубация оплодотворенной яйцеклетки с последующим переносом эмбриона в полость матки. В течение последующих недель (до момента формирования плаценты) женщина должна принимать увеличенную вдвое дозировку препаратов прогестерона.

19 Кроме ИКСИ существует еще несколько дополнительных методов, повышающих шансы зачатия. ИМСИ. Это усовершенствованная методика, когда при выборе сперматозоида учитываются его морфологические особенности. Для детального рассмотрения мужской половой клетки используется сильный микроскоп с 6000-кратным увеличением (при проведении ИКСИ – 400-кратным). Основные критерии, которыми должен обладать сперматозоид – это наличие овальной головки с выделенной акросомой, хвоста и шейки. ПИКСИ. Перед оплодотворением мужская половая клетка проходит тестирование на зрелость путем погружения в пробирку с гиалуроновой кислотой. Считается, что те сперматозоиды, которые отреагировали на компонент, имеют меньше ДНК нарушений и являются морфологически зрелыми. Отобранные таким образом мужские гаметы считаются оптимальными для зачатия. ПИД (предимплантационная проверка). Это обследование уже оплодотворенной яйцеклетки, которая начала делиться. Метод основан на отщеплении части зиготы с последующим генетическим анализом. ПИД-проверка рекомендуется парам, у которых существует высокая вероятность рождения малыша с хромосомными отклонениями.

20 Основные особенности течения беременности - склонность к невынашиванию; - повышенная частота многоплодной беременности; - высокая вероятность развития плацентарной недостаточности и преэкласмпсии Предрасполагающие факторы повышения частоты невынашивания беременности после применения ИКСИ: - применение препаратов - индукторов суперовуляции, которые создают предпосылки для прерывания беременности наряду с высоким уровнем содержания фолликулостимулирующего гормона; - изменение гормонального фона в результате проведения мероприятий, направленных на созревание фолликулов; - агрессивный способ получения гамет, временное пребывание гамет и эмбрионов вне организма женщины, микроманипуляции с ними, перенос эмбрионов в матку;

21 Основные направления в процессе ведения беременности после применения вспомогательных репродуктивных технологий: предотвращение преждевременного прерывания беременности; тщательное наблюдение и соответствующие лечебные мероприятия при многоплодной беременности; раннее выявление врожденных пороков развития плода; профилактика и лечение ПН и преэклапсии.

22 Дети, родившиеся с помощью ЭКО, а также вспомогательных методов этой процедуры, ничем не отличаются от тех малышей, которые зачались естественным способом. Риск хромосомных мутаций и аномалий развития во всех случаях встречается с одинаковой частотой. Некоторые специалисты даже отмечают, что у ЭКО-детей реже бывают отклонения в связи с более внимательным ведением беременности со стороны женщины (своевременного прохождения ультразвуковой диагностики и скрининга, сдачи анализов, полного обследования обоих супругов при планировании малыша и т.п.). Отзывы родителей по поводу экстракорпорального оплодотворения положительные, ведь без этой процедуры у них, возможно, никогда бы и не было своего малыша. Также многие женщины отмечают, что после первой ЭКО-процедуры не всегда происходит зачатие и для его осуществления необходимо сделать примерно две или три попытки, а иногда и больше.