РЕГУЛЯЦИЯ КИНЕТИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ РЕАКЦИЙ. - презентация

1 РЕГУЛЯЦИЯ КИНЕТИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ РЕАКЦИЙ

2 ИНГИБИРОВАНИЕ рН – ЗАВИСИМОСТИ ЗАВИСИМОСТИ ОТ ТЕМПЕРАТУРЫ v = dP/dt = f([E]0, [S]0, [X (I)0], pH, T, …(ε, μ…)…t)

3 Ингибирование ферментов ОБРАТИМЫЕ КОНКУРЕНТНЫЕ НЕКОНКУРЕНТНЫЕ БЕСКОНКУРЕНТНЫЕ НЕОБРАТИМЫЕ МОДИФИКАТОРЫ СУБСТРАТОПОДОБНЫЕ (СУИЦИДНЫЕ)

4 CH3 O | || CH3 – CH – O – P – F | CH3 – CH – O | CH3 диизопропилфторфосфат CH3 O | || СH3 – CH – O – P – F зарин | CH3 CH3 O | || (СH3)3 C – CH – O – P – F зоман | CH3

5 Ингибирование ферментов ИНГИБИРОВАНИЕ СЕРИНОВЫХ ПРОТЕИНАЗ ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИМИ ОТРАВЛЯЮЩИМИ ВЕЩЕСТВАМИ E – OH + (R1, R2) P(O)F E – O – P(0)(R1, R2) + HF K i k i E + I EI EI k i I o [E] = [E] o exp (- _________ *t) K i +I 0

6 Ингибирование ферментов определение природы функциональных групп активных центров ферментов фиксация промежуточных соединений инактивация протеолитических ферментов титрование активных центров введение метки – репортера установление взаимосвязи структуры и реакционной способности

7 Обратимое ингибирование КИНЕТИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ДЕЙСТВИЯ ИНГИБИТОРОВ Сорбционная область Каталитический центр

8 Обратимое ингибирование конкурентное неконкурентное бесконкурентное

9 Обратимое ингибирование КОЛИЧЕСТВЕННЫЕ ПАРАМЕТРЫ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩИЕ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИНГИБИРОВАНИЯ K i и I 50 конкурентное неконкурентное

10 Ингибиторный анализ ИССЛЕДОВАНИЕ ТОПОГРАФИИ И СТРУКТУРЫ АКТИВНЫХ ЦЕНТРОВ БИФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИНГИБИТОРЫ

11 Ингибирование ферментов рН-зависимости ферментативной активности: протон - ингибитор и активатор фермента

12 рН-зависимости ферментативной активности Протон - как ингибитор и активатор фермента

13 рН-зависимости ферментативной активности Зависимость кажущейся максимальной скорости от рН

14 рН-зависимости ферментативной активности Определение pK a функциональных групп фермента и фермент-субстратного комплекса