«Внедрение инновационных технологий в Центре лабораторной медицины АО «Республиканский диагностический центр» Масс-спектрометрия - высокая точность и качество исследований в микробиологической практике» Л. Евстафьева

Эффективное лечение Правильная идентификация возбудителя Определение чувствительности к антимикробным препаратам Микробиологическая служба оказывает существенную помощь лечащему врачу в выборе наилучшей схемы лечения инфекционной патологии

Время от первичного посева до получения результата идентификации на автоматических и полуавтоматических анализаторах Время от первичного посева до получения результата идентификации на масс-спектрометре часа 24 часа

Масс-спектрометрия метод идентификации молекул путем измерения отношения их массы к заряду в ионизированном состоянии MALDI (Matrix Assisted Laser Desorption 'lonization) ионизация вещества с помощью матрицы и лазерного излучения. TOF MS (Time of Flight Mass-Spectrometry) время-пролетная масс-спектрометрия. Масса молекулы оценивается по времени пролета от источника ионизации до детектора. MALDI-TOF масс-спектрометрия

Анализатор VITEK MS приобретен в 2014 г. В настоящее время, это единственный в Казахстане прибор для идентификации микроорганизмов на внутривидовом уровне методом спектрального анализа, используемый в клинической практике.

Высокая производительность 100% специфичность и чувствительность Высокая скорость анализа Преимущества метода масс-спектрометрии Определение спектра белков напрямую из бактериальной колонии, взятой с чашки первичного посева материала Увеличение базы данных (755 клинически значимых видов микроорганизмов)

2 34 Смешивание колонии бактерий со специальной матрицей Этап 1: подготовка образца 1 Кристаллизация лизированного материала с веществом- матрицей, переход молекул лизата в газовую фазу и их ионизации.

Белки Бактериальная клетка Протеом Mass ( m/ z) Масса молекулы % I n t e n s i t y V o y a g e r S p e c # 1 = > A d v B C ( 3 2, 0. 5, 1. 0 ) = > N F 0. 7 [ B P = , ] Видовое определение Этап 2: Идентификация Слайд помещают в анализатор, в котором молекулы матрицы и анализа (белков) переходят в газовую фазу, а протонированные молекулы матрицы взаимодействуют с белками, перенося на них положительный заряд. Под действием электрического поля ионизированные белки движутся от источника ионизации к детектору с ускорениями обратно пропорциональными их атомным массам. Программное обеспечение прибора оценивает время пролета частиц и преобразует эту информацию в спектр молекулярных масс (масс-спектр). Масс-спектр сравнивается со спектрами из базы данных и на основании сведений о массах белков происходит идентификация микроорганизмов.

Добавление 1.0 мкл матричного раствора Масс-спектрометр Автоматизированная система идентификации Шаг 1 Шаг 2 Шаг 3 Просушивание: 1-2 мин. Шаг 4 Загрузка Шаг 5 Создание спектра ( 2 мин на 1 образец) Целевой слайд Бактерии, плесень, дрожжи,

99,9% достоверности результатов Результаты исследований На идентификацию одного микроорганизма требуется около 2 -х минут времени

Что дало нам приобретение автоматического анализатора VITEK MS: эффективное лечение пациента снижение смертности существенное сокращение сроков госпитализации экономия бюджетных средств. Полная автоматизация стандартных биохимических методов идентификации микроорганизмов Увеличение скорости исследования Стандартизация микробиологических исследований Повышение качества проводимых исследований Расширение спектра выделяемых патогенов Сокращение времени на проведение идентификации и сокращение срока выдачи результата

Спасибо за внимание!