БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ – РЕЖИМ РАБОТЫ И НАЗНАЧЕНИЕ. МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ. МОРФОЛОГИЯ БАКТЕРИЙ. ИММЕРСИОННАЯ МИКРОСКОПИЯ. ПРОСТЫЕ МЕТОДЫ ОКРАСКИ.

Микробиология наука о живых организмах, невидимых невооруженным глазом (микроорганизмах) К микроорганизмам относятся: бактерии грибы простейшие вирусы Раздел микробиологии, изучающий бактерии, называется бактериология

Правила работы в бактериологической лаборатории: форма одежды сотрудников лаборатории (медицинские халаты, шапочки, сменная обувь, маска из марли). Работа с особо опасными микроорганизмами проводится в специально оборудованных лабораториях особо опасных инфекций (ООИ), в лаборатории запрещается принимать пищу и курить, рабочее место должно быть в порядке (личные вещи хранить в специально отведённых местах), при случайном попадании инфицированного материала на стол, пол и другие поверхности это место необходимо тщательно обработать дезинфицирующим раствором, хранение, наблюдение за культурами микроорганизмов и их уничтожение проводится согласно специальным инструкциям, по окончании работы руки следует тщательно вымыть, рабочее место и помещение тщательно продезинфицировать.

Методы диагностики бактериальных инфекций 1.Микроскопический –окраска бактериальными красителями –окраска люминесцирующими красителями 2.Бактериологический (выделение и изучение чистой культуры) 3.Биологический (заражение чувствительных лабораторных животных) 4.Серологический (обнаружение АТ в сыворотке больного) 5.Метод кожно-аллергических проб 6.Молекулярно-генетический (ПЦР, ДНК-гибридизация)

Микроскопия Для обнаружения возбудителя в исследуемом материале – микроскопический метод диагностики Для идентификации возбудителя – часть бактериологического метода исследование в живом состоянии исследование окрашенных препаратов фазово- контраст- ная микро- скопия темно- польная микро- скопия исследование в живом состоянии исследование окрашенных препаратов фазово- контраст- ная микро- скопия темно- польная микро- скопия иммер- сионная микро- скопия люминес- центная микро- скопия иммер- сионная микро- скопия

Микроскопический метод Для изучения окрашенных бактериальных препаратов используют световой иммерсионный микроскоп

Методика приготовления препарата из бактерий (мазка) Обезжирить предметное стекло: натереть сухим мылом, затем снять его марлевой салфеткой. В центр стекла (на обезжиренную поверхность) стеклянной палочкой нанести каплю физиологического раствора. Прокаленной в пламени спиртовки и остуженной бактериологической петлей забрать бактериальную массу (очень немного, менее булавочной головки). Приготовить равномерную взвесь бактериальной массы в капле физ. раствора и растереть её тонким слоем мм в диаметре, высушить на воздухе. Зафиксировать – провести предметное стекло (мазком кверху) через пламя спиртовки 3-4 раза так, чтобы слегка обжигало тыл руки. При фиксации бактерии погибают, поэтому в окрашенных препаратах (мазках) бактерии изучают в неживом состоянии!!!

Методы окраски бактерий: – простые (используют один краситель), – сложные (используют 2 и более красителей, нанося их на мазок в определённой последовательности) Перед микроскопией на препарат наносят каплю иммерсионного масла, в которую опускают объектив

Бактериальные красители 1.Основные (щелочные): красные: сафранин, основной фуксин; фиолетовые: генцианвиолет, кристаллвиолет, метилвиолет; синие: метиленовый синий; зеленые: малахитовая зелень; коричневые: везувин, хризоидин; 2. Кислые: красные: кислый фуксин, эозин; желтые: пикриновая кислота

Морфологическая классификация бактерий

Стафилококк (окраска генцианвиолетом)

Стрептококк (окраска генцианвиолетом)

Стрептококк окраска генцианвиолетом окраска метиленовым синим

Тетракокк (окраска генцианвиолетом)

Крупная палочка (окраска генцианвиолетом)

Мелкая палочка (окраска фуксином)