Лекция 38 Методы исследования водно- минерального обмена Перфильева Г.В. 2013г. ГБОУ ВПО КрасГМУ имени профессора В.Ф. Войно – Ясенецкого Минздравсоцразвития России Фармацевтический колледж.

План лекции: Методы исследования минерального обмена Подготовка обследуемых Получение биологического материала Условия хранения биологического материала Методы исследования КОС Преаналитический этап исследований КОС

Методы исследования минерального обмена: Пламенная фотометрия - один из видов эмиссионного спектрального анализа, основанного на фотометрировании излучения элементов в пламени и позволяет определять их концентрацию с точностью до 2-4 %. Принцип метода заключается на способности ряда элементов испускать лучи света определенной длины волны в пламени газовой горелки. Натрий и калий способны интенсивно излучать свет в низкотемпературном пламени. Возникающее в пламени излучение определяемого элемента определяется посредством светофильтров от излучения других элементов и, попадая на фотоэлемент, вызывая фототок, интенсивность которого измеряется гальванометром. Натрий окрашивает пламя в ярко-желтый цвет. Калий – слабый красно-фиолетовый.

Ионометрический метод- метод определения натрия и калия, состоит в измерении электрохимического потенциала ионоселективного электрода, погруженного в исследуемый раствор. Электрическая схема потенциометра включает в себя электрод сравнения (потенциал которого известен) и индикаторный (ионоселективный) электрод, потенциал которого измеряется. Значение потенциала индикаторного электрода позволяет судить об активности присутствующих в растворе ионов: калия, натрия, кальция.

Для определения других электролитов (кальция, хлоридов, магния, железа) обычно используют методы: Колориметрический метод: основан на образовании цветных соединений электролитов с различными реактивами. Титриметрический метод. Данный метод имеет основной недостаток - индикаторный переход не всегда удается зафиксировать точно. Ферментативный колориметрический метод.

Основными показателями минерального обмена в организме служат: Калий Натрий Кальций Магний Фосфор Хлорид Железо ЖСС Исследование проводят в цельной крови (капиллярной и венозной), сыворотке, плазме, моче.

Подготовка обследуемых: Забор крови делают утром с 8 до 10 часов утра. В экстренных случаях взятие крови осуществляется в любое время дня. Кровь берут натощак, после 8-12-часового голодания. Воздержание от приема алкогольных напитков не менее 24 часов Следует исключить продукты, содержащие исследуемые минеральные вещества; Не менее, чем за 5 дней следует исключить препараты, содержащие железо, кальций, магний Исключается физическое напряжение и эмоциональное возбуждение, для чего дают обследуемому отдохнуть 15 минут.

Получение и хранение биологического материала: Предпочтительным материалом для исследования является сыворотка крови, негемолизированная и не желтушная; При заборе крови пациент находится в положении сидя или лежа, при повторных исследованиях следует соблюдать одно и то же положение тела; Кровь собирают в неметаллическую и не стеклянную посуду, пластмассовые пробирки, избегая венозного стаза и гемолиза;

При транспортировки биоматериала следует избегать вибрации пробирок, длительное хранение цельной крови недопустимо; При получении сыворотки кровь следует как можно быстрее отцентрифугировать, и отделить ее от сгустка и клеток крови; В программе срочных анализов определение натрия и калия должно быть выполнено не позднее 30 мин с момента поступления.

Методы исследования КОС Исследования кислотно-основного равновесия крови проводят на специальных газоанализаторах, прямым методом измерения рН (потенциометрия) и рСО 2 (полярография), а также температуры и барометрического давления. Затем автоматически проводятся расчет остальных показателей КОР.

Для оценки и правильной диагностики нарушений КОР крови существуют специальные номограммы. В номограммах указана область нормальных значений КОР крови, острых или хронических метаболических и респираторных нарушений. При нанесении полученного анализа на такую номограмму можно четко определить, какое нарушение КОР имеется у больного и правильно выбрать метод его коррекции.

RADIOMETER PRESENTATION1212/01/2014 The ABL90 FLEX Портативность анализатора плюс: Полный спектр параметров Точность измерения Простота в проведении пробы Минимум обслуживания Автоматическая система контроля качества Ideal for point-of-care testing pH Blood gases pCO 2, pO 2 Electrolytes cK +, cNa +, cCa 2+, cCl - MetabolitescGlu, cLac, ctBil CO-oximetry sO 2, ctHb, FO 2 Hb, FCOHb, FMetHb, FHHb, FHbF

Преаналитический этап исследований КОС Для исследования КОР идеальным материалом является артериальная кровь, которую обычно берут из лучевой, локтевой, бедренной артерий стеклянным или пластиковым шприцом. Время взятия крови с 7 до 9 ч, натощак, исключая физическую активность за 3 дня до исследования; За 5 минут до взятия крови обследуемый находится в покое, взятие проводят в одном положении – сидя или лежа; Время наложения жгута не превышает 1 мин; Основное требование к получению материала – взятие в анаэробных условиях, отсутствие пузырьков воздуха в шприце, выбор адекватного антикоагулянта без его избытка (гепарин);

Катетеризация артерий: формирование порта доступа

Забор пробы цельной артериальной крови шприц PICO 70 – устройство для пункционного взятия артериальной крови

Недостаточное перемешивание пробы перед анализом При хранении крови происходит разделение пробы на плазму и клетки крови Время седиментации варьирует значительно plasma blood cells

Недостаточное перемешивание пробы Полная седиментация определяется легко, частичная- нет Пробы необходимо тщательно перемешивать до полной гомогенизации

Исследование крови после забора должно быть выполнено не позднее чем через 5-10 мин, если исследование не может быть выполнено в указанные сроки, закупоренный шприц помещают в воду с кусочками льда, не более чем на 1 час; Перед исследованием шприц с кровью извлекают из ледяной бани и выдерживают при комнатной температуре не менее 10 мин; Перед измерением кровь перемешивают путем вращения шприца между ладонями и переворачиванием его вверх и вниз; У пациентов в критическом состоянии анализ выполняют немедленно.

рН 7,35-7,45 АЦИДОЗ рН < 7,35 АЛКАЛОЗ рН > 7,45 РЕСПИРАТОРН ЫЙ рСО 2 > 45 mm Hg МЕТАБОЛИЧЕСК ИЙ BE > (-2)- (-4) ммоль/л НСО3 < 24 mmol/l РЕСПИРАТОРН ЫЙ МЕТАБОЛИЧЕСК ИЙ рСО 2 > 45 mm Hg BE > (-2)- (-4) ммоль/л НСО3 < 24 mmol/l рСО 2 < 35 mm Hg BE > 2- 4 ммоль/л НСО3 < 24 mmol/l

Домашнее задание Пустовалова Л.М. Основы биохимии для медицинских колледжей стр