Лекция 16 Санитарная микробиология ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «КРАСНОЯРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ ПРОФЕССОРА В.Ф. ВОЙНО-ЯСЕНЕЦКОГО» МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ КОЛЛЕДЖ

План Цели и задачи санитарной микробиологии. Санитарные показательные микроорганизмы. Федеральные Закон о санитарно- эпидемическом благополучия населения. Правила отбора и транспортировки проб. Сопроводительная документация Методы исследования в санитарной микробиологии. Аппаратура Нормативная документация.

Цели и задачи Цель: Исследование всех объектов окружающей сред, как возможных и факторов передачи инфекционных заболеваний. Задачи : 1)изучение закономерностей взаимообмена (круговорота) потенциально опасных для человека микробов между микропопуляциями людей, животных и совокупностью объектов окружающей среды, включая условия существования микробов в этих трех средах; 2) поиск и использование микробиол. методов оценки безопасности для человека пищевых продуктов, воды, воздуха и разнообразных предметов и материалов; 3) разработка нормативов, устанавливающих соответствие качественного и количественного состава микрофлоры конкретных объектов внешней среды гигиеническим требованиям; 4) выдвижение рекомендаций с целью оздоровления внешней среды посредством антимикробных мероприятий и оценки их эффективности.

Санитарные показательные микроорганизмы. ВодаПочваВоздух Azotobacterактиномицетыпигментные сапрофитные бактерии (микрококки, сарцины) Nitrobacterспорообразующие бактерииактиномицеты Micrococcusспирохетыплесневые, дрожжевые грибы Pseudomonasмикобактерии Proteusпсевдомонады Spirillumазотфиксирующие и нитрифицирующие бактерии архебактерии Эшерихии

Федеральные Закон о санитарно- эпидемическом благополучия населения. Санитарные нормы, правила и гигиенические нормативы – нормативные акты, устанавливающие критерии безопасности и безвредности для человека факторов среды его обитания, а также санитарно-гигиенические и противоэпидемические требования по обеспечению благоприятных условий его жизнедеятельности. Санитарные правила обязательны для соблюдения государственными органами, предприятиями, учреждениями, организациями, общественными объединениями, должностными лицами и гражданами (статья 4). За нарушения санитарного законодательства и санитарных правил виновные лица привлекаются к дисциплинарной, административной, материальной и уголовной ответственности в соответствии с действующим законодательством Республики Беларусь (статья 45). Действия должностных лиц, органов и учреждений, осуществляющих государственный санитарный надзор, могут быть обжалованы вышестоящему по подчинению должностному лицу, а также в суд (статья 39).

Правила отбора и транспортировки проб. Взятие материала предпочтительно проводить до начала антибактериальной терапии. На фоне антибактериальной терапии материал забирают перед очередным введением антимикробных препаратов, то есть в момент, когда их концентрация в организме минимальна. При взятии пробы следует строго соблюдать правила асептики, во избежание ее случайной посторонней контаминации. Для взятия проб следует использовать стерильные инструменты, а для их транспортировки стерильные пробирки или контейнеры. Использование нестерильных сухих, чистых пробирок допускается только для отбора и транспортировки крови на серологические исследования. Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования. Транспортировка материала должна осуществляться в максимально короткие сроки: как правило, не более 1,5 2 часов.

Всегда следует стремиться использовать транспортные системы со средой (консерванты), что позволяет пролонгировать время транспортировки до 24 часов и более или осуществлять посев непосредственно у постели больного (кровь, ликвор и др.); Материал для исследования на неспорообразующие анаэробы, доставляемый без использования транспортных систем со средой (консервантов) должен транспортироваться: · в специальном герметично закрытом флаконе, заполненном инертным газом, в который проба вносится путем прокола крышки иглой шприца; · в одноразовом шприце, из которого удален воздух, и кончик которого закрыт либо стерильной резиновой пробкой, либо иглой, с надетым на нее штатным защитным колпачком.

Сопроводительная документация Все образцы должны иметь четкую маркировку, обеспечивающую их безошибочную идентификацию. К каждому образцу прикладывается направление. В направлении на исследование должны быть отображены следующие данные: дата и время назначения исследования; дата и время взятия биологического материала; Ф.И.О. пациента; отделение, номер амбулаторной карты/истории болезни, номер палаты; возраст, пол; диагноз; Ф.И.О. лечащего врача; перечень необходимых исследований; подпись специалиста, проводившего забор клинического материала.

Методы исследования в санитарной микробиологии. Аппаратура а) исследование смывов на стафилококки проводят при обследовании кремово-кондитерских цехов, столовых и ресторанов, молочных кухонь и других пищеблоков, обращая особое внимание на контроль рук персонала; б) общую микробную обсемененность можно определить для установления эффективной обработки посуды, а также при оценке моющих и дезинфицирующих средств. Методика посева смывов на бактерии группы кишечных палочек При плановых санитарно-гигиенических обследованиях для выявления БГКП производят посевы смывов на среды Кесслера с лактозой или Кода, при этом в пробирку со средой опускают тампон и переносят оставшуюся смывную жидкость. Посевы на средах Кесслера или Кода инкубируют при 37°С, через 1824 часа со среды Кесслера производят высев на плотную дифференциальную среду Эндо, со среды Кода высев производят в случае изменения окраски среды или ее помутнения.

Посевы помещают в термостат при температуре 37 °С на 24 часа, после чего просматривают. Из колоний, подозрительных или типичных для БГКП, готовят мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Обнаружение грамотри- цательных палочек указывает на наличие БГКП. Методика посева на общую бактериальную обсемененность Перед посевом смывов в пробирку с тампоном добавляют 5 мл 0,1% пептонной воды или изотонического раствора хлорида натрия. Тампон тщательно отмывают, после чего 1,0 мл смывной жидкости помещают в чашку Петри и заливают расплавленным МПА. Чашки помещают в термостат при 30°С. Предварительный подсчет выросших колоний производят через 48 часов, окончательный через 72 часа. Количество колоний, выросших на чашке, умножают на 10 для определения общего количества бактерий, содержащихся на поверхности исследуемого предмета. Методика посева на золотистый стафилококк Для выявления золотистого стафилококка посев смывов производят на чашки с желточно-солевым агаром, непосредственно втирая посевной материал тампоном, затем последний погружают в пробирку с 6,5% солевым бульоном. Оценка результатов Обнаружение санитарно-показательных и условно- бактерий в смывах с поверхностей чистых, подготовленных к работе предметов, инвентаря и оборудования, а также рук персонала свидетельствует о нарушении санитарного режима и дает основание для проведения административных мер.

Аппаратура В современных научно-исследовательских микробиологических лабораториях используются такие достижения техники, как электронный и люминесцентный микроскопы, инфракрасные спектрофотометры, ультрацентрифуги и другие современные приборы. Вместе с тем в практическую микробиологию эти достижения входят чрезвычайно медленно. Основные методы, применяемые в сегодняшней микробиологической практике, разработаны еще в прошлом веке. Подтверждением этому служит номенклатура аппаратов и приспособлений, широко используемых в современной микробиологической практике: печь Пастера, аппарат Коха, шпатели Дригальского, чашки Петри и др., вошедших в практику еще в конце XIX века. К сожалению, до последнего времени бактериологические методики имеют очень низкое техническое оснащение, весьма невелик уровень механизации как при проведении самих бактериологических исследований, так и при выполнении подготовительных операций.