1© ЗАО «Биоград», 2010г. к.х.н. Дробченко С.Н., проф. Кальво А., проф. Сэмюэльс Ф. ЗАО «Биоград», Санкт-Петербург, Orgenics LTD, Израиль, Orgenics PBS, Франция Бесприборные тесты для экстренной диагностики ВИЧ и оппортунистических инфекций

© ЗАО «Биоград», 2010г.2 Национальный проект «Здоровье» Быстрые простые бесприборные тесты (БПТ), специально разработанные для использования в небольших лабораториях, сегодня с успехом используются в крупных клиниках и диагностических центрах для своевременного тестирования пациентов. Для предотвращении заноса инфекции в лечебно- профилактические учреждения, снижения риска заражения и адекватного назначения химиотерапии важным фактором является выявление заболевания на ранних стадиях инфицирования.

© ЗАО «Биоград», 2010г.3 Результаты испытаний тест-систем на сероконверсионной панели HIV 9017, Bioclinical Partners, США ИФА(ELISA) планшетные тест-системы (Данные производителя панели) БЫСТРЫЕ ПРОСТЫЕ ТЕСТЫ Отчет о сравнительных испытаниях диагностических иммуноферментных тест-систем для выявления антител к ВИЧ, разрешенных к применению в РФ, МЗ РФ , таблица 24 образца Дата забора образца Abbott AxSYM Anti- HIV1/2 Organon Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ab Roche Enzymum -Test HIV Combi Abbott Architect HIV Ag/Ab Combo Serodia HIV-1/2, ИХА ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 БиСпот, ИФА Genie II HIV-1/HIV-2, ИХА Determine HIV ½, ИХА Retrocheck ИХА ,310,470,230, ,310,500,230, ,390,480, ,400,520,250, ,680,570, ,930,690,570, ,01 0,62 1,401, ,43 0,80 1,961, ,231,083,172, ,511,453, ,12 1,704,435,

© ЗАО «Биоград», 2010г.4 Тесты ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 БиСпот выявляют антитела к ВИЧ на дней раньше, чем экспресс- тесты, основанные на принципе иммунохроматографии, и на дней опережают ELISA тест-системы известных зарубежных производителей.

© ЗАО «Биоград», 2010г.5 Испытания, проведенные ВОЗ на сероконверсионных панелях показали, что тест ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 БиСпот выявляет антитела к ВИЧ-1 на 8,5 дней раньше референс-теста Enzygnost Anti-HIV 1/2 Plus. Тесты Детермин HIV 1/2 выявляли антитела позже референс теста. Данные по испытаниям ВОЗ тест-систем Retrocheck и Иха-ВИЧ 1,2 - Фактор отсутствуют.

© ЗАО «Биоград», 2010г.6 Характеристики тест-систем для экспресс скрининга на антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 (World Health Organization. HIV Аssays: Operational Characteristics: Report 8-15). Название (производитель) Serodia -HIV-1/2 (Fujirebio) Span Combaids Visual (Span Diagnostics) Capillus HIV-1/HIV-2 (Trinity Biotech) ImmunoComb II BiSpot HIV 1&2 (PBS Orgenics) Determine HIV-1/2 (Abbott Laboratories) Genie II HIV-1/HIV-2 (Bio-Rad) Отчет ВОЗ Чувствительность 100 (98,5-100,0) 96,5 (93,5-99,5) 100,0 (99,6-100,0) 100,0 (99,6-100,0) 100 (95,5-100) 100 (97,7 -100) Специфичность 99,3 (98,5-100,0) ,8 (97,6-100,0) 99,7 (99,1-100,0) 99,4 (96,7-100) 99,3 (98,1 -100) Простота Выполнения СложныйПростойСамый простой Простой Рекомендован какПодходящий Наиболее подходящий Подходящий Наиболее подходящий Наиболее подходящий Подходящий

© ЗАО «Биоград», 2010г.7 По результатам испытаний ВОЗ, специфичность тест- систем ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 БиСпот превосходит специфичность тест-систем Determine HIV-1/2 в два раза (количество ложноположительных результатов 0,3% и 0,6% соответственно).

© ЗАО «Биоград», 2010г.8 PPV экспресс-тестов при различной распространенности ВИЧ Распространенность ВИЧ Прогностическая ценность положительного результата (PPV) ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 БиСпотDetermine HIV-1/2 0,01% - данные ВОЗ3,23%1,64% 0,10%25,02%14,30% 0,30% - средняя по РФ50,08%33,40% 1,00%77,10%62,74% 6,00% - данные ВОЗ95,51%91,41% Чувствительность × Распространенность Чувствительность × Распространенность + (1-Специфичность)×(1-Распространенность) PPV =

© ЗАО «Биоград», 2010г.9 При среднем по России уровне распространенности ВИЧ (0,30%) прогностическая ценность положительного результата у тест-систем ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 БиСпот составляет 50%, у тест-систем Determine HIV-1/2 - 33%.

© ЗАО «Биоград», 2010г.10 Минздравсоцразвития рекомендует тесты ИммуноКомб для обследования доноров крови, органов и тканей человека, скрининговых исследований; для подтверждения результатов скрининговых исследований (приказ 292 от , 322 от , 336 от ).

© ЗАО «Биоград», 2010г.11 Отличительным качеством разработанной фирмой Orgenics тест-системы ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 ТриСпот Аг-Ат является дифференцированное определение антигена ВИЧ p24 и антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Это увеличивает чувствительность по антигену ВИЧ p24 и позволяет определить статус каждого из маркеров, что особенно важно в период «окна».

© ЗАО «Биоград», 2010г.12 ИммуноКомб HIV 1+2 TriSpot (4) - биотинилированный бычий сывороточный альбумин (БСА) (внутренний контроль) (3) - моноклональные антитела к антигену ВИЧ-1 p24 (2) - рекомбинантный антиген ВИЧ-2 (env gp36) (1) - рекомбинантный антиген ВИЧ-1 (env gp41) ИммуноКомб ® II ВИЧ 1+2 ТриСпот Аг-Ат

© ЗАО «Биоград», 2010г.13 Тест- система была испытана в медицинских центрах Израиля, Франции, Бельгии, России. Всего было исследовано 3297 образцов сыворотки и плазмы, включая 878 образцов положительных по ВИЧ-1 (включая группу О), 224 образца, положительных по ВИЧ-2 и 2195 отрицательных образцов. Среди отрицательных образцов было 462 образца от пациентов с различными инфекционными (гепатитом A, B, C, HTLV, CMV, HSV, EBV, малярией и вакцинированные против вируса гриппа) и неинфекционными заболеваниями и 190 образцов групп высокого риска.

© ЗАО «Биоград», 2010г.14 В качестве референс-тестов использовались BioRad Genscreen Plus HIV Ag-Ab, Abbott HIV Ag/Ab Combo и Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ab. Тест-система ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 ТриСпот Аг-Ат выявила все положительные образцы, что соответствует чувствительности 100% по всем трем маркерам. Специфичность составила: антитела к ВИЧ %, антитела к ВИЧ %, антиген p %.

© ЗАО «Биоград», 2010г.15 Чувствительность по антигену ВИЧ p24 при исследовании образцов с ранних стадий первичной ВИЧ инфекции составила 5 пг/мл, включая группу О. При исследовании образцов с известным количеством антигена ВИЧ p24, была продемонстрирована способность определения до 1.5 пг/мл. На сегодняшний день тест-система ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 ТриСпот Аг-Ат демонстрирует самую высокую чувствительность по антигену ВИЧ p24 по сравнению с производимыми в мире иммуноферментными тест- системами.

© ЗАО «Биоград», 2010г.16 При исследовании сероконверсионных панелей ИммуноКомб ТриСпот определял ВИЧ на 2-13 дней раньше чем антительные тесты на ВИЧ 3-го поколения.

© ЗАО «Биоград», 2010г.17 Технология ИммуноКомб позволяет диагностировать широкий спектр инфекций: ВИЧ, HTLV, Гепатиты А, В, С, Цитомегалию, Токсоплазмоз, Хламидиоз, Краснуху, Хеликобактериоз, тропические инфекции.

© ЗАО «Биоград», 2010г.18 Схема постановки анализа 6. Результат анализа в виде окрашенных точек. Верхняя точка: внутренний контроль. Нижняя точка и (или) средняя точки появляются в случае наличия - инфекции. 1. Для индивидуального тестирования гребешок можно согнуть и отломить необходимое количество зубцов. 2. В ряд А ванночки вносятся образцы (сыворотка, плазма или цельная кровь) и контроли. 3. Гребешок вставляется в ряд А и инкубируется (реакция антиген-антитело). 4. Гребешок перемещается из ряда в ряд ванночки в соответствии с инструкцией (промывки и связывание с конъюгатом). 5. Цветная реакция в ряду F.

© ЗАО «Биоград», 2010г.19 Тесты ИммуноКомб сертифицированы СЕ и широко используются более чем в ста странах мира. Как достоверные, высокочувствительные и специфичные тесты ИммуноКомб отобраны для программ ВОЗ, UNAIDS, Красного Креста, допущены FDA (США) для поставок по специальным программам фонда Клинтона.

© ЗАО «Биоград», 2010г.20 Минздравсоцразвития рекомендует тесты ИммуноКомб для обследования доноров крови, органов и тканей человека, скрининговых исследований; для подтверждения результатов скрининговых исследований (приказ 292 от , 322 от , 336 от ).

21© ЗАО «Биоград», 2010г. ЗАО «Биоград» 17 лет в России! Адрес:197101, г. Санкт-Петербург, Петровский пр., д. 14, 19-Н тел./факс:(812) , (многоканальные)

© ЗАО «Биоград», 2010г.22 Спасибо за внимание.