Факторы ангиогенеза при новообразованиях кости Кафедра клинической биохимии и лабораторной диагностики МГМСУ Козачок И.В. Тимофеев Ю.С.

VEGF-B167 VEGF-B186 PLGF-1,2 VEGF-A121 VEGF-A145 VEGF-A165 VEGF-A206 VEGF-A189 VEGF-EVEGF-C VEGF-D VEGFR-1 VEGFR-2 VEGFR-3 PI3-K Akt/PKBp38MAPK Raf MEKERK Проницаемость сосудов Выживание эндотелиальных клеток Миграция эндотелиальных клеток Пролиферация эндотелиальных клеток Система VEGF

На базе НИИ клинической онкологии РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН в период с 2001 по 2006 гг. проводили исследование, целью которого являлся сравнительный анализ содержания VEGF и VEGF-R2 в сыворотке крови практически здоровых людей, больных первичными злокачественными, доброкачественными и пограничными опухолями костей для оценки его взаимосвязи с основными клинико-морфологическими, биохимическими характеристиками новообразований и прогнозом. В настоящей работе описывается роль VEGF, VEGF-R2 и ЩФ в сыворотке крови больных первичными саркомами костей На базе НИИ клинической онкологии РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН в период с 2001 по 2006 гг. проводили исследование, целью которого являлся сравнительный анализ содержания VEGF и VEGF-R2 в сыворотке крови практически здоровых людей, больных первичными злокачественными, доброкачественными и пограничными опухолями костей для оценки его взаимосвязи с основными клинико-морфологическими, биохимическими характеристиками новообразований и прогнозом. В настоящей работе описывается роль VEGF, VEGF-R2 и ЩФ в сыворотке крови больных первичными саркомами костей

Характеристика исследуемых пациентов Возраст от 5 до 66 лет. Группу контроля составили 104 практически здоровых человека (64/61,5% мужчины и 40/38,5% женщин) в возрасте от 5 до 60 лет. 228 больных новообразованиями костей Для проведения сравнительного анализа все больные разделены на 3 группы: 190 больных саркомами костей, 22 - доброкачественными и опухолеподобными процессами и 16 - пограничными новообразованиями

Биохимические методы исследования Концентрация VEGF Иммуноферментный метод: реактивы «Quantikine human VEGF» («R&D Systems Inс.», США) Концентрация VEGF-R2 Автоматический универсальный ридер для микропланшет ELх800 фирмы «Bio-Tek Instruments, Inc.» (США). Спектрофотометрический метод на автоматическом анализаторе «Hitachi 911» («Boehringer Mannheim», Германия). Концентрация ЩФ

Оценка уровня VEGF ±40,3 ±73,4±50,6 ±7,5 Исходные уровни VEGF в сыворотке Наиболее высокие значения VEGF выявлены в сыворотке крови больных опухолью Юинга (медиана 391,9 нг/мл) и остеосаркомой (медиана 382,2 нг/мл), а самые низкие - при хондросаркомах (медиана 198,8 нг/мл). Достоверно высокие значения VEGF обнаружены у больных при поражении саркомами трубчатых костей (медиана 382,2 нг/мл) по сравнению с плоскими (медиана 149,6 нг/мл). Выявлены достоверно высокие медианы VEGF в сыворотке крови больных с поражением саркомой большеберцовой (440 нг/мл) и плечевой (407 нг/мл) костей по сравнению с опухолями лопатки (101,2 нг/мл) и малоберцовой кости (201 нг/мл).

Оценка уровня рецептора VEGF-R2 и VEGF Уровни рецептора были снижены при пограничных и доброкачественных новообразованиях костей относительно контроля (р=0,01), при злокачественных новообразованиях они не отличались от уровней VEGF- R2 у практически здоровых людей. «низкие» (до 270 нг/мл) VEGF и VEGF-R2 при злокачественных новообразованиях кости 8,6 0,5 нг/мл, n=5 «средние» (270 до 500 нг/мл) 6,3 1,0 нг/мл, n=4 «высокие» (от 500 нг/мл) 6,9 0,6 нг/мл, n=5 Значения VEGFЗначения VEGF-R2

На злокачественный характер процесса в кости могут указывать: Совместное использование VEGF и VEGF-2R при определении злокачественности. Значения VEGF в сыворотке крови от 500 нг/мл и выше При «низких» показателях VEGF (до 270 нг/мл) уровень его растворимой формы VEGF-R2 - от 7,0 нг/мл и выше. Высокие значения VEGF и его рецептора обнаружены у 21,4% больных злокачественными новообразованиями костей и ни в одном наблюдении не выявлены в группе больных доброкачественными и пограничными новообразованиями костей

Связь VEGF с уровнями ЩФ при новообразованиях кости Достоверная положительная корреляционная зависимость обнаружена между значениями VEGF и ЩФ у больных саркомами плоских костей в возрасте старше 20 лет (r=0,64; p=0,005). В области «низких» (до 270 нг/мл) значений VEGF при злокачественном характере новообразования кости у 65,2% пациентов выявлены повышенные значения ЩФ, тогда как при доброкачественном процессе – только у 16,7%. «Низкие» Значения VEGF (< 270 нг/мл) Повыш енная ЩФ (>400 Ед/л) 65,2% 66% 16,7% Пограничные новообразования Саркомы Доброкачественные заболевания

Оценка безрецидивной выживаемости больных опухолями костей ЩФ (Ед/л) Число больных Безрецидивная выживаемость 1-летняя5-летняя

1) группа - оба маркера с «низкими» прогностически благоприятными значениями (VEGF400 Ед/л) – VEGF-ЩФ-; 3) группа - повышен только VEGF (VEGF>500 нг/мл; ЩФ

Повышение точности распознования злокачественного процесса в кости Использование исследуемых молекулярно-биологических маркеров, сыворотке крови наряду с основными клинико-морфологическими признаками - пол, возраст пациента, максимальный размер первичного новообразования кости в дискриминантном анализе позволяют в дооперационном периоде повысить точность распознавания новообразований.

У больных с подозрением на новообразование кости необходимо определять до лечения исходные показатели VEGF, VEGF-R2, ЩФ в сыворотке крови. Уровни VEGF в сыворотке крови больных новообразованиями костей равные 500 нг/мл и более с высокой вероятностью свидетельствуют о злокачественном характере процесса. При низких уровнях VEGF высокие уровни VEGF-R2 позволяют с высокой вероятностью предположить о злокачественном характере процесса. Исходно высокие уровни VEGF ( и ЩФ) в сыворотке крови больных новообразованиями кости наряду с общепринятыми клиническими и морфологическими характеристиками опухолевого процесса могут быть использованы как критерии неблагоприятного прогноза. Выводы и практические рекомендации: