ПГД: опыт работы клиники Мать и дитя Гоголевский П.А.

I. Эмбриологический этап ПГД II. Клинический случай ПГД

Сравнение эффективности двух систем ISM1\2 и BA1\2 для биопсии эмбриона и последующего культивирования до стадии бластоцисты стадии бластоцисты 1-й день 3-й день 5-й день 2PN 6-8 бласт. бластоцисты ISM1/ ,6 % 57 55,3% BA1/ ,8% ,5%

Методы создания отверстий в ZP для проведения биопсии Использование кислого раствора Тироде Использование кислого раствора Тироде Использования лазера Использования лазера Механический хэтчинг Механический хэтчинг

Выполнение 3-D хэтчинга для последующей биопсии эмбриона для последующей биопсии эмбриона

Различные формы разрезов при выполнении 3-D хэтчинга Х-образная Т-образная V-образная

Биопсия эмбриона

ПЦР FISH

Развитие эмбрионов до стадии бластоцисты при использовании двух типов биопсийных пипеток. 98\161 60,9% 98\161 60,9% 92\136 67,6% 92\136 67,6%

Развитие эмбрионов до стадии бластоцисты после биопсии 2-х бластомеров. 8 бластомеров 43.4% (46\106) 8 бластомеров 43.4% (46\106) 7 бластомеров 24.5% (24\98) 7 бластомеров 24.5% (24\98) 6 бластомеров 5% (3\60) 6 бластомеров 5% (3\60) Dimerel, ESHRE 2005

Развитие эмбрионов до стадии бластоцисты после биопсии бластомера. 8 бластомеров 81,7% (94\115) 43.4% 8 бластомеров 81,7% (94\115) 43.4% 7 бластомеров 62,9% (56\89) 24.5% 7 бластомеров 62,9% (56\89) 24.5% 6 бластомеров 52,2% (35\67) 5% 6 бластомеров 52,2% (35\67) 5% 5 бластомеров 19,2% (5\26) 5 бластомеров 19,2% (5\26)

Результативность биопсии одного бластомера для выполнения ПГД с помощью ПЦР. Биопсировано эмбрионов -87 Биопсировано эмбрионов -87 Отсутсвие амплификации -8 9,2% Отсутсвие амплификации -8 9,2% ADO - 4 4,6% ADO - 4 4,6% Нормальная амплификация ,2% Нормальная амплификация ,2%

Сравнение результативности биопсии одного или двух бластомера биопсии одного или двух бластомера для ПГД с помощью ПЦР (Gooseens et al.ESHRE 2005) биопсия 1 бластомера. Биопсия 2-х бластомеров Циклов4645 эмбрионов Остались эмбрионов без диагностики 46 16,0% 11 4,0% ПЭ в циклах 39 85% 35 78% 14%

Плюсы и минусы биопсии двух бластомеров + Меньше эмбрионов остаются без диагностики, когда проводят биопсию двух бластомеров. - Меньше эмбрионов пригодны для П.Э. или КРИО после культивирование in vitro до стадии бластоцисты

Всех циклов ПГД - 25 Всего клинических беременностей 9 36% роды 3 прогрессирующие беременности 6 прервавшиеся беременности -1 циклы беременности Селекция пола FISH 11 4 Скрининг анеуплоидий 13 и 21 хр. FISH 7 2 КФ-ПЦР Скрининг анеуплоидий X.Y КФ-ПЦР 6 2 Моногенные заболевания КФ-ПЦР 1 1 Результаты работы клиники Мать и дитя

Муковисцидоз (МВ) или кистозный фиброз (CF) - одно из наиболее частых моногенно наследуемых заболеваний Частота МВ колеблется среди представителей европеоидов от 1:600 до 1:12000 новорожденных Частота встречаемости МВ в России - 1:12000 новорожденных. Ежегодно в России рождается - 300, а в мире - более детей, больных МВ На сегодняшний день выявлено более 1200 мутаций гена CFTR, ответственных за развитие симптомов МВ ПГД муковисцидоза клинический случай

Семейный молекулярно-генетический анализ PGD PGD ПГД муковисцидоза клинический случай

предварительное моделирование данного случая ПГД на ядросодержащих клетках – единичных лейкоцитах периферической крови супругов ПГД муковисцидоза клинический случай

Получено ооцитов – 18 из них MII-16 2PN-14 Биопсировано-10 ПГД муковисцидоза клинический случай

ПГД муковисцидоза П.Э.

Мальчик 1700, 40 см Мальчик 1800, 44 см Девочка 1730, 41 см Переведены на 2 этап. ПГД муковисцидоза клинический случай

ПГД муковисцидоза клинический случай PGD