Муратова Камилла Равиловна ФГБОУ ВПО Башкирский государственный педагогический университет им. М.Акмуллы, г. Уфа, Россия ЖИЗНЕННЫЙ ЦИКЛ И ЗООСПОРОГЕНЕЗ МИКРОСКОПИЧЕСКОЙ ВОДОРОСЛИ EUSTIGMATOS POLYPHEM (PITSCHMANN) HIBBERD 1981 (EUSTIGMATOPHYTA) Руководитель: Сафиуллина Л.М., к.б.н. ФГБОУ ВПО Башкирский государственный педагогический университет им. М.Акмуллы, кафедра ботаники, биоэкологии и ландшафтного проектирования

Актуальность Изучение жизненного цикла водорослей на сегодняшний день является необходимым условием для их идентификации на уровне вида. И хотя в последнее десятилетие в альгологии все чаще применяют молекулярно-биологические методы определения принадлежности вида к той или иной эволюционной линии, такая классификация водорослей далеко не всегда хорошо согласуется с морфологическими критериями определения и поиск новых критериев для их идентификации остается до сих пор актуальным.

Цель исследования - выявить критические морфологические признаки вида Eustigmatos polyphem (Eustigmatophyta) изучив его жизненный цикл и зооспорогенез.

Задачи исследования: 1. Освоить методику наблюдения за жизненным циклом водоросли и подобрать методику массового получения зооспор; 2. Изучить морфометрию вегетативных клеток, автоспор и зооспор; 3. Обозначить ключевые морфологические признаки определения вида E. polyphem.

Материалы и методы Объект исследования - аутентичный штамм водоросли Eustigmatos polyphem ACKU (orig. SAG 38.84) из коллекции КНУ им. Т. Шевченко. Классический рисунок Eustigmatos polyphem (Pitschmann) Hibberd 1981, (= Pleurochloris polyphem Pitschmann 1969) (Ettl, Gartner, 1995).

Материалы и методы Водоросль выращивали на питательной среде 3NBBM; Просмотр проводили на 3, 7, 14, 21 и 28 сутки, а также спустя 6 мес., 1,5 и 2,5 года с момента культивирования; При каждом просмотре измеряли диаметр 50 вегетативных клеток; Оценивали морфометрические показатели клеток, наблюдали за развитием автоспор, сопоставляя данные с диагнозом вида, приведенным в определителе; Для массового получения зооспор использовали метод разбавления питательной среды дистиллированной водой в пропорции 1:1; Просмотр проводили с использованием микроскопа Axio Imager A2 с реализацией ДИК-контраста с камерой Axio Cam MRC при увеличении ×1000.

Диаметр вегетативных клеток 5-11 (-16) мкм; Клетки в основном молодые Хлоропласт чашевидный с двумя лопастями; Пиреноид ярко выражен, полиэдрический. Результаты и обсуждение 3 сутки просмотра

Результаты и обсуждение 7 сутки просмотра Диаметр вегетативных клеток 7-13 (-14) мкм; Клетки на разных стадиях развития; Единично присутствовали автоспоры.

Результаты и обсуждение 14 сутки просмотра Диаметр вегетативных клеток (-22) мкм; Хлоропласт чашевидный, чаще с несколькими лопастями; Автоспоры по 2-4 (до 8), присутствовали массово.

Результаты и обсуждение 21 сутки просмотра Диаметр вегетативных клеток 7-13 (-14) мкм; Хлоропласт чашевидный, как правило, с двумя лопастями; Автоспоры встречались единично.

Результаты и обсуждение 28 сутки просмотра Диаметр вегетативных клеток 9-13 (-14) мкм; Морфология клеток идентична 21 суткам просмотра.

Результаты и обсуждение Возраст культуры 6 месяцев Диаметр вегетативных клеток мкм; Единично эллипсоидные клетки, в дл. 13,86 мкм, в шир. 11,14 мкм; Автоспоры по 2-4, мало; Протопласт зернистый; Хлоропласт чашевидный, двулопастной, пиреноид полиэдрический; Иногда в клетках небольшие каратиноидные глобулы.

Результаты и обсуждение Возраст культуры 1,5 года Диаметр вегетативных клеток (-28) мкм; Единично эллипсоидные клетки, в дл. 12,57 мкм, в шир. 11,86 мкм; Автоспоры единично; Протопласт зернистый; Имеются оранжево- красные каратиноидные глобулы.

Результаты и обсуждение Возраст культуры 2,5 года Диаметр вегетативных клеток 9-16 мкм; Много эллипсоидных клеток, в дл мкм, в шир. 11,22 мкм; Протопласт желтый, гранулированный; В клетках ярко выражены крупные каратиноидные глобулы.

Результаты и обсуждение Зооспорогенез Зооспоры сильно вытянутые, грушевидной формы; В базальной части оранжевое каратиноидное пятно. Длина зооспор мкм; Имеется два очень тонких жгутика длиной до 7 мкм, которые скручиваясь между собой создают впечатление одного; Жгутики переплетаясь образуют на конце петлю; Через 5-7 мин. после выхода из зооспорангия зооспоры округляются, после чего отбрасывают свернутый в кольцо жгутик.

Заключение В ходе исследования были выявлены все стадии жизненного цикла водоросли Eustigmatos polyphem от образования и выхода автоспор и зооспор до старения вегетативных клеток и их морфологической изменчивости. Впервые описана методика получения зооспор для E. polyphem, морфология которых отличается не только от классического описания в определителе, но и от зооспор других видов эустигматофитовых, что необходимо использовать при идентификации вида. Также, впервые обнаружена возрастная морфологическая изменчивость вида E. polyphem при длительном культивировании и появление клеток характерных представителям рода Ellipsoidion. Это может служить отличительным признаком E. polyphem от близкого к нему по морфологии вида E. magnus, клетки которого при полиморфизме приобретают еще и статус рода Vischeria.

Благодарю за внимание!