Опыт применения метода ПЦР в диагностике менингитов различной этиологии Областная детская инфекционная клиническая больница г.Харьков Кухарь Д.И. к.мед.н. Книженко О.В. Гаман Э.С.
ДНК ДНК-полимераза Праймеры Стадии ПЦР Денатурация ДНК (95 о С) Отжиг праймеров (55-65 о С) Элонгация праймеров (72 о С)
Экспоненциальный характер течения ПЦР и накопления продукта реакции
На канале НЕХ– детекция амплифицированной ДНК
Эффективность расшифровки бактериальных менингитов
Аналитические характеристики Метод диагностики Чувствительность % Специфичность, % Микроскопия Бактериология ИФA ПЦР
Структура вирусных менингитов
C г в ОДИКБ г. Харькова с подозрением на менингит поступило 722 ребенка 119 подтверждена энтеровирусная этиология менингита Эффективность расшифровки энтеровирусных менингитов составила-16,5 % С июля 2010 диагностика менингитов дополнена методом ПЦР Эффективность расшифровки энтеровирусных менингитов составила- 68,2%
Зарегистрированные в Украине тест системы для ПЦР- диагностики АмплиСенс ДНК-технологии Литех Roche Abbott Seegene
Тест-системы Neisseria meningitidis Streptococcus pneumonia Haemofilus influenzae Enterovirus HSV I/II CMV EBV HHV-6 Mycobacteria tuberculosis Lysteria monocytogenes
Выводы Метод ПЦР позволяет: Улучшить расшифровку менингитов различной этиологии Выявлять ассоциации (бактерия-бактерия, бактерия-вирус, вирус-вирус) Использовать на фоне проводимой антибиотикотерапии Проводить количественное исследование Документировать и пересматривать полученные результаты Проводить дальнейшее генотипирование
Спасибо за внимание