Возбудители пищевых интоксикаций 1. Семейство Bacillaceae Род Clostridium Вид Cl.botulinum 2. Семейство Bacillaceae Род Clostridium Вид Cl.perfringens 3. Семейство Micrococcaceae Род Staphylococcus Вид S. aureus

Мазок из чистой культурыCl.botulinum окраска по Граму (видны неокрашенные субтерминальные споры) Гр+ палочки с закруглёнными концами, Подвижны(перитрихи) Образуют овальные субтерминальные споры Строгие анаэробы Возбудитель ботулизма - Cl.botulinum

Растут на средах с низким окислительно- восстановительным потенциалом: клостридиум агар, среда Вильсон-Блэр, железосульфитное молоко Рост на железо-сульфитном агаре Культуральные свойства При росте на желточной среде вокруг колоний виден лецитиназный венчик

Cl.botulinum Образует экзотоксины, различающиеся по антигенным свойствам, и поэтому признаку подразделяется на серотипы; В настоящее время известны 8 серологических подтипов ботулинического токсина: A, B, C1, C2, D, E, F, G; Ботулизм у человека могут вызывают серотипы A, B, E, F, G, но самым сильнодействующим является тип А. Факторы патогенности

Структура и механизм действия ботулотоксина Ботулотоксины продуцируются в виде комплекса нейротоксина и нетоксичного белка; Образующийся протоксин в результате протеолиза (например, трипсином) распадается на две субъединицы: тяжелую – взаимодействует с клеточным рецептором и легкую- токсический компонент Принципиальный механизм действия всех типов ботулинических токсинов заключается в пресинаптической блокаде транспортных белков, обеспечивающих транспорт везикул ацетилхолина через кальциевые каналы периферического холинергического синапса с последующим выбросом ацетилхолина в синаптическую щель. Ацетилхолин является медиатором в синапсах парасимпатической нервной системы, некоторых синапсах ЦНС, в соматических двигательных и преганглионарных симпатических нервных окончаниях.

Структура и механизм действия ботулотоксина При нормальной передаче импульса в области соединения нервного окончания с мышцей (синапса) происходит высвобождение нейромедиатора ацетилхолина, который вызывает сокращение мышцы. Это довольно сложный процесс. Сначала пузырьки, содержащие ацетилхолин, подходят к мембране (внешней оболочке) нервного окончания. Чтобы ацетилхолин высвободился, пузырьки должны слиться с мембраной, что невозможно без специального «комплекса слияния», состоящего из нескольких белков (SNARE-комплекс). Ботулинический токсин проходит через мембрану нервного окончания внутрь, а затем «отрезает» от комплекса слияния определённые белки. Например, ботулинический токсин типа А атакует белок SNAP-25. Без полноценного SNARE пузырьки с ацетилхолином уже не могут слиться с мембраной и остаются внутри нервного окончания. В итоге, несмотря на то что нервное волокно продолжает посылать команды, сокращения мышцы уже не происходит.

Ботулотоксин Сильнейший из известных ядов (летальная доза µg) Кроме нейротоксическогодействия обладает лейкотоксической, гемолитической и лецитиназной активностью Попадает с пищей, путем пиноцитоза в лимфатические сосуды и кровь, далее проходит гематоэнцефалический барьер

Патогенез ботулизма

Клиника Выделяют: пищевой ботулизм, ботулизм новорожденных и раневой ботулизм Ботулизм новорожденных: от развернутой симптоматики до наступления смерти, неотличимой от синдрома внезапной смерти Связан с попаданием и прорастанием спор в ЖКТ. Последнее обусловлено недостаточной сформированностью нормальной микрофлоры Часто источником спор является мед, поэтому его не рекомендуют детям первого года жизни.

Клиника Пищевой ботулизм: (споры выдерживают кипячение 1 час, сам токсин менее термостабилен) первые симптомы через 3-12 часов до нескольких дней ( чем раньше, тем тяжелее протекает заболевание) Наиболее частые симптомы – диплопия, дисфония, дизартрия, дисфагия; В результате распространения нервно-мышечной блокады появляются вялые парезы; Больной в сознании, ориентирован, температура тела не повышается; Смерть наступает от паралича дыхательной мускулатуры

Клиника Раневой ботулизм: редкая форма, может встречаться у больных наркоманией Обусловлен действием токсина, вырабатываемого ботулинической палочкой, которая проросла из споры, попавшей в рану; Инкубационный период чаще дней; Может быть повышена температура тела, остальные симптомы типичны

Лабораторная диагностика Материалом для исследований служат: рвотные массы, промывные воды желудка, кровь, остатки пищи. Методы диагностики: 1.Серологический метод (РОНГА – реакция обратной непрямой гемагглютинации с диагностическим поливалентной или моновалентными (А, В, Е) ботулиническим сыворотками; ИФА,реакция преципитации в геле. 2. Биологический метод (реакция нейтрализации токсина in vivo (обычнона мышах) с диагностическим моновалентными ботулиническими сыворотками. 3. Бактериологический метод – выделение и идентификация C.botulinum аналогично другим клостридиальным инфекциям. При обнаружении ботулиническоготоксина в клиническом материале бактериологическое исследование не проводится

Биологический метод (реакция нейтрализации токсина in vivo) Контрольная группа (Вводят исслед.материал) Исслед.материал + ат против токсина А Исслед.материал + ат против токсина В Исслед.материал + ат против токсина Е

Лечение Используют поливалентную противоботулиническую сыворотку лошадиную Содержит антитела против ботулинических токсинов серотипа А, В и Е Получают гипериммунизацией лошадей соответствующим анатоксином последующей очисткой

Применение ботулотоксина Ботулотоксин в виде препаратов, содержащих мизерные дозы токсина, например, ботокс, нашел применение в терапии и косметологии