ОСТРЫЕ РЕСПИРАТОРНЫЕ ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ

Семейство Orthomyxoviridae Вирус гриппа тип А Вирус гриппа тип В Вирус гриппа тип С Род Influenzavirus

Морфологические характеристики ТипАВТипАВ 8 фрагмент ов «минус» РНК NK (нуклеокапсид), окружен М-белком (матриксным) 2 типа шипиков гликопротеидов 1) Гемагглютинин (H) 2) Нейраминидаза (N) ТипСТипС 7 фрагмент ов «минус» РНК Фосфолипидный суперкапсид Гликопротеидные шипики гемагглютинина ( Н)

Характеристика Orthomyxoviruses Вирион имеет сферическую форму или нитевидную Диаметр нм В наружную липидную оболочку погружены три белка - гемагглютинин, нейраминидаза и ионный канал (белок М2), играющие основную роль в инфекционном процессе. Под липидной оболочкой матриксный М1 белок – выполняет структурную функцию и организует сборку вируса в клетке хозяина

Характеристика Orthomyxoviruses Геном – однонитевая фрагментированная (8 фрагментов) «минус» РНК РНК тесно связана с белками капсида с образованием 8 рибонуклеопротеидов (РНП) спирального типа симметрии Каждый фрагмент РНП связан с вирусной РНК-зависимой РНК- полимеразой

Шипики гемагглютинина (HA) Тримеры На поверхности вириона до 500 шипиков HA Известно 16 антигенных вариантов (H1- H15), HA осуществляет связывание с рецепторами восприимчивой клетки (первый этап взаимодействий вируса с клеткой), Антитела против HA – вируснейтрализующие = протективные Название получил за способность вызывать агглютинацию эритроцитов

Шипики нейраминидазы (NA): Тетрамеры Количество примерно 20% (около 100 на вирион) Известно 10 антигенных вариантов (N1 –N10). NA участвует на последнем этапе взаимодействия вируса с клеткой Ускоряет высвобождение вируса из клетки и обеспечивает правильное отпочковывание, предотвращая аггрегацию вирусных частиц. Антитела к NA не являются протективными, но препятствуют распространению вируса в организме.

Антигены Белок капсида – С-антиген, отвечает за принадлежность к типу А, В или С Выявляется в РСК Специфичности НА и NA вместе определяют подтип Известны 16 подтипов H-антигена (H1– H16) и 10 подтипов N-антигена (N1- N10) Выявляются в РТГА

Классификация вирусов гриппа По специфичности С-белка выделяют 3 типа: Вирус гриппа тип A: -HA и NA могут подвергаться существенным изменениям, либо демонстрировать незначительные вариации Вирус гриппа тип B: HA подвержен относительно медленным изменениям; встречается только у человека Вирус гриппа тип C (7 РНП) представлен только одним антигенным вариантом; встречается только у человека

Номенклатура ВОЗ предложили систему номенклатуры вирусов гриппа, основанную на обозначении антигенного подтипа H и N Тип вируса гриппа Город, где впервые был выделен Количество изолятов Год выделения Тип HA и NA A Сингапур 61986H1N1 Пример: A/Сингапур/6/86 (H1N1)

Взаимодействие вируса с клеткой Первым вступает в контакт с рецепторами клетки хозяина гемагглютинин связывается с сиаловой кислотой, входящей в состав рецептора клетки хозяина Фермент нейраминидаза отщепляет концевые группы сиаловой кислоты клеточных рецепторов, в результате чего клетка теряет способность распознавать антиген, и вирус проникает в нее путем эндоцитоза

Взаимодействие вируса с клеткой Изменение рН в кислую сторону активирует трипсиноподобные ферменты, которые частично расщепляют гемагглютинин Конформационные изменения НА индуцируют слияние мембран вируса и эндосомы рН активирует ионные каналы, образованные М2 белком образуется пора слияния, через которую в цитоплазму открывается путь для чужеродного генетического материала. РНП проникают в клеточное ядро.

Взаимодействие вируса с клеткой Геном транскрибируется тремя полимеразными полипептидами Образовавшиеся мРНК поступают в цитоплазму для синтеза вирусных белков Большая часть белков остается в цитоплазме; HA, NA ассоциированы с ЦПМ Но белок капсида возвращается в ядро для формирования новых РНП с копиями генома РНП опять возвращается в цитоплазму для сборки вирионов; М1 белок координирует сборку Белки капсида играют определяющую роль в переключении репликативного цикла между экспрессией и сборкой

Репликация (-)РНК вируса гриппа в составе РНП. При репликации используется фрагмент клеточной мРНК, на который достраивается копия вирусного генома. Таким образом,на рибосомы поступает гибридный продукт клеточной и вирусной РНК

сборка новых вирусных частиц, которые с помощью нейраминидазы высвобождаются из поврежденных клеток при этом продукты их распада вызывают интоксикацию организма и лихорадочное состояние, и с кровотоком разносятся по всему организму. Взаимодействие вируса с клеткой

Тропизм к цилиндрическому эпителию дыхательных путей – по типу «замок-ключ» Высокая степень репродукции 1 вирус > свыше 100( до нескольких сотен) вирионов Поражение сосудов, геморрагические осложнения Суперинфекция в форме бактериальных осложнений Основные свойства вируса гриппа

Генетическая и антигенная вариабельность вируса гриппа Отличительная особенность вирусов гриппа - высокая изменчивость антигенных свойств. Дрейф – точечные мутации в генах, кодирующих H и N В результате ежегодно возникают эпидемии, а не пандемии, так как защита от предыдущих контактов с вирусом сохраняется, хоть она и недостаточна.

Шифт – полная замена генов, кодирующих H и N Это возможно, поскольку геном вируса гриппа сегментирован При одновременном заражении клетки двумя разными штаммами сегменты их реплицирующихся геномов смешиваются в любых сочетаниях Генетическая и антигенная вариабельность вируса гриппа

поэтому новые вирионы содержат разные наборы генов, заимствованные от каждого из исходных вирусов. Такое комбинирование сегментов вирусной РНК называют генетической перетасовкой, или реассортацией

Несмотря на антигенную гетерогенность, вирусы со всеми известными сочетаниями поверхностных белков выделены только от диких птиц водного и околоводного комплексов (уток, чаек и т.д.) до недавнего времени выделяли вирусы только трех подтипов гемагглютинина (Н1-Н3) и двух нейраминидазы (N1-N2) Все 4 пандемии ХХ века: испанский грипп 1918 г. -H1N1, азиатский грипп в 1957 г. - H2N2, гонконгский грипп в 1968 г. - H3N2 русский грипп в 1977 г. - H1N1. Все они - реассортанты вирусов гриппа птиц и человека

Источник инфекции Больной человек, выделяющий вирус с кашлем,чиханьем кашлемчиханьем Больной заразен с первых часов заболевания и до 35 суток болезни. Аэрогенный механизм передачи Симптомы: лихорадка, фотофобия, слезоточивость + рис.

Патогенез Первичная репродукция вируса: клетки мерцательного эпителия верхних дыхательных путей поверхностное поражение клеток трахеи и бронхов, характеризующееся процессами дегенерации, некроза и отторжения пораженных клеток раздражение – кашель, чихание. Первичная виремия – токсическое действие на организм в виде миалгий, повышения t, озноба, головной боли. Результатом вирусемии, которая длится, как правило, дней, является проникновение возбудителя во внутренние органы. Вирусный антиген определяется в крови, селезенке, лимфатических узлах, миндалинах и ткани головного мозга. Главным звеном в патогенезе гриппа является поражение сосудистой системы, которое возникает вследствие репродукции вируса в клетках эндотелия и проявляется повышением проницаемости сосудов, ломкостью их стенок, нарушением микроциркуляции

Патогенез Падение тонуса мелких сосудов и повышение их проницаемости приводит к нарушению микроциркуляции и диапедезным кровоизлияниям, развитию ранних изменений в легких: отеку легочной ткани и множественным кровоизлияниям в альвеолы и интерстиций легкого, играет ведущую роль в развитии неврологических синдромов:нарушение проницаемости сосудов и токсическое влияние вируса на рецепторы сосудистого сплетения мозга вызывают гиперсекрецию спинномозговой жидкости с развитием циркуляторных расстройств, приводят к внутричерепной гипертензии и отеку мозга. Важная роль в патогенезе гриппозной инфекции принадлежит иммунным механизмам, особенно Т-лимфоцитам и их субпопуляциям, естественным киллерам (NК). Подавление функциональной активности Т-системы иммунитета, NК характеризует тяжелые формы с более длительной персистенцией вируса и развитием вторичных бактериальных осложнений.

Осложнения при гриппе При тяжёлых формах гриппа развивается сосудистый коллапс, оттек, геморрагический синдром, присоединяются вторичные бактериальные осложнения. Причинами возникновения осложнений при гриппе могут быть следующие особенности инфекционного процесса: вирус гриппа оказывает выраженное капилляротоксическое действие, способен подавлять иммунитет, разрушает тканевые барьеры, облегчая тем самым агрессию тканей резидентной флорой.

Формы осложнений Лёгочные пневмония, геморрагическая или вторичная бактериальная; формирование абсцесса лёгкого, образование эмпиемы. Внелёгочные бактериальные риниты, синуситы, отиты, трахеиты; миокардит, Миозит, энцефалопатия токсико-аллергический шок, Синдром Гийена-Барре

Разработаны три типа вакцин: живые, инактивированные, сплит- вакцины Для их получения используют штаммы вирусов гриппа, которые ожидаются как возбудители будущей эпидемии. За последние 20 лет в вакцины входят 3 актуальных штамма подтипа А/H1N1, А/H3N2 и тип В. Разрешены к применению инактивированные зарубежные сплит-вакцины (содержат только очищенные гемагглютинины и нейраминидазы вышеуказанных штаммов): Название Фирма Флюарикс Смит Кляйн Бичем (Бельгия) Ваксигрипп Пастер Мерье Коннот (Франция) Бегривак Кайрон Беринг (Германия) Инфлювак Солвей Фармасьютикал Голл.) Новый подход к вакцинации – применение форсифицированных вакцин – вакцинальный материал+ иммуномодулятор (Гриппол) Специфическая профилактика гриппа

Живая гриппозная вакцина выпускается в виде трехвалентного препарата типа A(H1N1)+A(H3N2)+B. vir -эпидемический вирус ca - холодоадаптирова нный донор аттенуации rec - реассортантный вакцинный штамм

Этиотропная терапия Ингибиторы М2, депротеинизации («раздевание вируса») : АМАНТАДИН, РЕМАНТАДИН - б локировка протонных помп и предотвращение проникновения вируса в клетку - (грипп, ОРВИ), АЛЬГИРЕМ (в форме сиропа при ОРВИ у детей), ТРОМAНТАДИН (герпес-инфекция) Ингибиторы транскрипция (репликации вируса): ФОСКАРНЕТ, ВАЛТРЕКС (ацикловир + аминокислота ВАЛИН), ЦИТАРАБИН (ЦМВ), РИБАВИРИН (герпес, РНК- вирусы: гриппа А и В, парагриппа, кори) Индукторы интерферона: анаферон, циклоферон, арбидол, амиксин, неовир Ингибиторы нейраминидазы - тамифлю Нормальный человеческий иммуноглобулин

Лабораторная диагностика Исследуемый материал: 1. Носоглоточный смыв 2. Мокрота 3. Сыворотка Методы: 1. Экспресс-диагностика (обнаружение вируса или вирусных антигенов в клиническом материале): РИФ, иммунная электронная микроскопия (ЭМ), ПЦР 2. Вирусологический метод – выделение вируса в культурах клеток (метод бляшек) или заражением куриного эмбриона 3. Серологический метод – РСК, РТГА, ИФА с парными сыворотками

1. Определение непосредственно в материале от больного Immune EM Immuofluorescent staining of OP or NP samples

Культивирование Идентификация в РТГА Заражение куриного эмбриона в амниотическую полость Выявление НА в амниотической жидкости в реакции гемагглютинаци и Идентификация вируса по реакции торможения гемагглютинации со специфической сывороткой