Экспрессия гетерологичных генов !. Экспрессионные вектора ДНК 3 РНК-полимераза РНК 5 Рибосома N Белок Для экспрессии чужеродного гена необходимо организовать.

Презентация:



Advertisements
Похожие презентации
Регуляция активности генов. Экспрессия генов Регуляция транскрипции (прокариоты) Оперон (Ф.Жакоб, Ж.Л. Моно, 1961 г.) – группа генов, кодирующих белки,
Advertisements

Тема: Регуляция экспрессии генов у про- и эукариот генов у про- и эукариот.
Лактозный оперон Подготовил: Проверил:. Введение Группы генов Строение гена Виды оперонов Лактозный оперон. Схема строения lac-оперона Структурные гены.
3. РЕГУЛЯЦИЯ. Размеры геномов Бактерии: – (~3 мм) –Escherichia coli: Дрожжи: – Drosophila: Растения:
Лекция. Регуляция экспрессии генов. Репарация ДНК. Мутации. Генная инженерия Регуляция биосинтеза белка у прокариот по теории Жакоб и Моно. Особенности.
Лекция 6 Начало регуляции. Основные регуляторные события (механизмы) регуляции Геном Транскриптом Протеом Метаболом Орган Организм Популяция Биосфера.
Трансляция. Регуляция биосинтеза белка.. План лекции 1.Условия, необходимые для трансляции. 2.Этапы биосинтеза белка. 3.Посттрансляционный процессинг.
Регуляция транскрипции и трансляции МОУ Сладковская СОШ. Учитель Волкова М. Е
Задачи: Дать характеристику особенностям экспрессии генов прокариот Тема: «Экспрессия генов прокариот» Пименов А.В.
Презентация проекта по биологии на тему: Регуляция на молекулярном уровне Выполнили Мазанов Александр Еремеев Илья Колесов Владимир Валуйская Виктория.
Транскрипция прокариот. Опероны.. Цикл транскрипции.
Прокариоты: инициация и регуляция транскрипции. РНК-полимераза Главный компонент (core-фермент) σ-фактор Элонгация Распознавание промотора β β α ω α 12.
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ СРЕДНЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «КРАСНОЯРСКИЙ МЕДИКО-ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ КОЛЛЕДЖ ФЕДЕРАЛЬНОГО.
Контроль знаний по теме Регуляция на молекулярном уровне.
Транскрипция – синтез РНК по матрице ДНК. Все типы РНК транскрибируются с ДНК.
Трансляция Активация аминокислот Образование (аминоацил- т РНК) Инициации Рибосома имеет 2 центра: пептидильный (П) и аминоацильный (А) Инициирующий кодон.
Генетика бактерий Организация генома прокариот. Бактериальная хромосома – это двуспиральная правозакрученная ДНК, замкнутая в кольцо ДНК нуклеоида находится.
Структура генома вирусов Вирусные (+) РНК-геномы кодируют несколько белков, среди которых РНК-зависимая РНК-полимераза (репликаза), способная синтезировать.
БИОСИНТЕЗ БЕЛКА. БИОСИНТЕЗ БЕЛКОВ тРНК иРНК Аминокислоты Энергия (АТФ) Ферменты (белки) рРНК ДНК Пища Вновь образованные Пища Сложность процесса –биосинтез.
Лекция 5 Наталья Володина. Транскрипция Транскрипция, трансляция Альбертс глава 5.
Транксрипт:

Экспрессия гетерологичных генов !

Экспрессионные вектора ДНК 3 РНК-полимераза РНК 5 Рибосома N Белок Для экспрессии чужеродного гена необходимо организовать 2 процесса - транскрипции и трансляции

Ori Ap r pl Ген Промотор – элемент, обеспечивающий инициацию транскрипции Р

α α Инициация транскрипции 5 TATAATTTGACA Pribnow box шт., 70 основная 32 шок 24 шок 38 голодание 28 жгутики 54 мет. азота 19 тр. железа

Сила промоторов ПромоторСила промотора в единицах Рbla P bla 1 P lac 2,5 P trp 6 P l 10 P r 12 P h207 T355 P a1 T779 Важнейшее свойство промоторов – возможность регуляции их активности.

Регуляция работы промоторов Лактозный оперон Жакоб и Мано 1961 г. Оперон – группа генов, находящихся под единой системой регуляции. Включает в себя гены и регуляторные элементы. lacZlacAlacYlac I t lacO -галактозидаза 125 кДа пермеаза 30 кДа трансацетилаза 30 кДа Оператор 21 н.п. Репрессор 38 кДа Лактоза - индуктор Индуцибельный оперон Индукция х1000 IPTG

Триптофановый оперон trpEtrpD trpC trpBtrpA trpR P trp trpO 4х12000 Триптофан - ингибитор Репрессибельный оперон. Репрессия х700 Ингибирование конечным продуктом Подавление х70 att Аттенуация – регуляция транскрипции на уровне трансляции Куда пропал еще один порядок ингибирования ? (Ослабление)

Аттенуация – регуляция транскрипции на уровне трансляции ww Лидерный пептид 13 ак Stop-кодон ДНК мРНК Где регуляция ? РНК полимераза

Аттенуация – регуляция транскрипции на уровне трансляции рибосома ww Если триптофана мало, то ww Если триптофана много, то Подавление х10

Гибридные промоторы

Другие варианты регуляции экспрессии на уровне транскрипции Ori Ap r РrРr c1ts Pr и Pl промоторы фага Репрессор

Другие варианты регуляции экспрессии на уровне транскрипции Ori Ap r Р Промотор фага Т7 pol lacO lacI E.coli BL21 P lac

Плазмида рЕТ23 T7 promoter

lacO

Ori Ap r pl Ген Все равно ни чего не получится ! РrРr Что дальше ? c1ts

ДНК 3 РНК-полимераза РНК 5 Рибосома N Белок Необходимо обеспечить инициацию трансляции