И ЗУЧЕНИЕ ВРЕМЕННОЙ ДИНАМИКИ ЭКСПРЕССИИ РАННИХ ГЕНОВ C FOS И ZIF /268 В МОЗГЕ ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ ПРИ ВЫРАБОТКЕ УСЛОВНОГО РЕФЛЕКСА ЗАМИРАНИЯ Сухоруков Григорий Шарф Леа НИИ Нормальной физиологии им. П.К.Анохина, РАМН Руководители: Иванова А.А. Ивашкина О.И.
Увеличение уровня мРНК с-fos и zif/268 в гиппокампе крыс после одной сессии обучения в пространственной версии водного лабиринта Морриса (Guzowski et al., 2001) Экспрессия белка zif/268 в дорзальном гиппокампе крыс после обучения условно- рефлекторному замиранию на звуковой стимул (Lonergan et al., 2010) Временная динамика индукции и спада уровня мРНК и белка с-fos и zif/268 в клетках первичной зрительной коры крыс (Zangenehpour, Chaudhuri, 2002)
Нейроанатомический субстрат условно-рефлекторного замирания: Боль (БС)Контекст (УС) Гиппокамп Миндалина Гипоталамус ТаламусКора СА1 Зубчатая фасция
Цель работы: Исследование временной динамики экспрессии генов транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в нейронах гиппокампа мыши после однократного сеанса обучения в модели условно-рефлекторного замирания Задачи исследования: 1) Провести количественный анализ экспрессии генов транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в нейронах гиппокампа через разные временные интервалы после сеанса обучения условно-рефлекторному замиранию 2) Охарактеризовать динамику изменения уровня экспрессии генов транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в течение 1 суток после обучения 3) Определить минимальный временной интервал после воздействия, за который уровень экспрессии каждого из исследованных генов достигает максимального значения
Методика: t, часы 0 ПК 0,50,251, ПК = пассивный контроль (отсутствие обучения) Иммуногистохимическое выявление белковых продуктов ранних генов c- fos и zif/268 (время до извлечения мозга) СА1 Зубчатая фасция Выработка условного рефлекса замирания: обследование камеры ЭКР (1 мА) 30 с 2 с 2 мин
Результаты: экспрессия Zif/268 в поле СА1 гиппокампа # # - p=0,09; критерий Манна-Уитни n=3 n=5 n=4
Результаты: экспрессия Zif/268 в зубчатой фасции гиппокампа n=3 n=5 n=4
Результаты: экспрессия c-Fos в поле СА1 гиппокампа * * * - p
Результаты: экспрессия c-Fos в зубчатой фасции гиппокампа * * - p
Выявлены отличия во временной динамике экспрессии транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268: экспрессия Zif/268 раньше достигает максимального уровня, чем экспрессия с-Fos Характер временной динамики экспрессии обоих ранних генов различается в двух исследованных зонах гиппокампа: в поле СА1 повышенный уровень экспрессии сохраняется в течение длительного времени; при этом в зубчатой фасции гиппокампа происходит быстрое кратковременное увеличение интенсивности экспрессии, и затем - ее быстрое снижение Выводы:
Иммуногистохимия