ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТОВ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ НА КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ ЗОНЫ СРАЩЕНИЯ ПРИ ЗАЖИВЛЕНИИ ВНУТРИСУСТАВНОГО ПЕРЕЛОМА Т.А. Силантьева ФГБУ «РНЦ «ВТО» им. акад. Г.А. Илизарова» Минздравсоцразвития России Система менеджмента качества сертифицирована на соответствие ISO 9001:2008
Актуальность Совершенствование систем, обеспечивающих функционально стабильный остеосинтез, достигает предела, обусловленного репаративными возможностями биологических тканей (Деев Р.В. с соавт., 2007). Заживление внутрисуставных переломов затруднено вследствие вымывания гематомы, являющейся дополнительным источником остеогенных клеток, из диастаза между отломками (Ирьянов Ю.М., 2006; Niikura T. et al., 2005); расстройств микроциркуляции вызывающих гипоксию, недостаток субстратов энергетического и пластического обмена (Абаев Ю.К., 2006). В последние годы для лечения суставной патологии применяются малоинвазивные методы, в том числе - на основе клеточных технологий (Соболь Э.Н., 2009). Применение дорогостоящих клеточных технологий представляется целесообразным лишь тогда, когда исчерпан собственный регенераторный потенциал клеток, присутствующих in situ в зоне повреждения (Eto H. et al., 2011)
Цель -Цель - исследование влияния фармакологических препаратов метаболического действия на дифференцировку клеток в зоне сращения внутрисуставного перелома
Условия эксперимента Эксперимент выполнен на 18 беспородных собаках в возрасте от 1 года до 3 лет. Оперативные вмешательства проведены к.в.н. В.В. Красновым. Содержание, уход и эвтаназия животных осуществлялись в соответствии с требованиями Министерства здравоохранения РФ к работе экспериментально-биологических клиник; в соответствии с «Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей». Проведение исследований одобрено этическим комитетом ФГУ «РНЦ «ВТО» им. академика Г.А. Илизарова» Минздравсоцразвития РФ
Этапы оперативного вмешательства абв а - остеотомия вертлужной впадины; б - вид операционного поля после монтажа аппарата; в - установка катетера с помощью направителя
Интраоперационное рентгенографическое контрастирование суставной полости препаратом «Омнипак» абв
Установка системы для выполнения внутрисуставных инъекций а - присоединение коннектора и фильтра к катетеру «Перификс»; б - соединение дозатора лекарственных веществ НДЛ-3 с набором для эпидуральной анестезии; в - закрепление контейнера с дозатором на опоре аппарата внешней фиксации аб в
Схема эксперимента Моделирование ацетабулярного перелома Внешняя фиксация аппаратом Моделирование ацетабулярного перелома Внешняя фиксация аппаратом Внутрисуставные инъекции физиологического раствора Моделирование ацетабулярного перелома Внешняя фиксация аппаратом Внутрисуставные инъекции композиции аскорбиновой кислоты и глюкозы Моделирование ацетабулярного перелома Внешняя фиксация аппаратом Внутрисуставные инъекции композиции аскорбиновой кислоты, глюкозы и аутоплазмы Группа 1 Группа 2 Группа 3 Группа 4 Группа 5 Объект исследования: вертлужная впадина в области моделирования перелома Методы исследования: светооптическая микроскопия гистоморфометрия, статистический анализ Параметры гистологической оценки: Тканевой и клеточный состав зоны сращения отломков Общая численная плотность дифференцированных форм клеток соединительной и опорных тканей (N А со) Численная плотность клеток: фибробластоподобных (N А фбл), хрящевых (N А х), костных (N А к), моно- и полинуклеарных фагоцитирующих (N А фг), сосудистого эндотелия (N А э) 14 суток после операции 2-5 сут. после операции
Анатомические препараты ипсилатеральной вертлужной впадины Моделирование ацетабулярного Перелома Внешняя фиксация аппаратом Моделирование ацетабулярного Перелома Внешняя фиксация аппаратом Внутрисуставные инъекции физиологического раствора Моделирование ацетабулярного Перелома Внешняя фиксация аппаратом Внутрисуставные инъекции композиции аскорбиновой кислоты и глюкозы Моделирование ацетабулярного Перелома Внешняя фиксация аппаратом Внутрисуставные инъекции композиции аскорбиновой кислоты, глюкозы и аутоплазмы
Типы сращения отломков вертлужной впадины Моделирование ацетабулярного перелома Внешняя фиксация аппаратом Группа 2 Соединительнотканное сращение отломков с низкой механической прочностью Моделирование ацетабулярного перелома Внешняя фиксация аппаратом Внутрисуставные инъекции физиологического раствора Группа 3 Фиброзно-хрящевое сращение отломков Моделирование ацетабулярного перелома Внешняя фиксация аппаратом Внутрисуставные инъекции композиции аскорбиновой кислоты и глюкозы Группа 4 Фиброзное сращение отломков Моделирование ацетабулярного перелома Внешняя фиксация аппаратом Внутрисуставные инъекции композиции аскорбиновой кислоты, глюкозы и аутоплазмы Группа 5 Костное сращение отломков
Преобладающие виды ткани в зоне сращения ацетабулярного перелома Группа 1. Рыхлая волокнистая соединительная ткань с резорбирующимися костными осколками Группа 2. Рыхлая волокнистая соединительная ткань с очагами остео- и хондрогенеза Группа 3. Хрящевая ткань Группа 4. Рыхлая волокнистая соединительная ткань с высокой численной плотностью фибробластоподобных клеток Группа 5. Грубоволокнистая трабекулярная костная ткань Парафиновые срезы, окраска гематоксилином и эозином, об. х40, ок. х10
Основные типы дифференцированных клеток в зоне сращения цетабулярного перелома Группа 1. Фибробластоподобные клетки, моно- и полинуклеарные фагоциты Группа 2. Фибробластоподобные клетки Группа 3. Хондроциты Группа 4. Фибробластоподобные клетки и фиброциты Группа 5. Остеобласты и остеоциты Парафиновые срезы, окраска гематоксилином и эозином, об. х100, ок. х10
ММ -2 * * * ** Гистоморфометрическое исследование клеточного состава зоны сращения ацетабулярного перелома * ** *** * * - различия значимы с группой 1; * * - различия значимы с группой 2 (р < 0,05)
Состояние гиалинового хряща полулунной поверхности отломков вертлужной впадины Группа 1. Группа 2. Группа 3. Группа 4.Группа 5. Парафиновые срезы, окраска гематоксилином и эозином, об. х10, ок. х10
Состояние волокнистого компонента связки головки бедренной кости Группа 1. Эластолиз, эластрексис, фрагментация волокон Группа 2. Эластолиз, эластрексис, разволокнение коллагеновых пучков Группа 3. Эластолиз, разволокнение коллагеновых пучков Группа 4. разволокнение коллагеновых пучков Группа 5. Минимальные деструктивные изменения Парафиновые срезы, окраска ореином по Унна-Тенцеру, об. х40, ок. х10
Благодарю за внимание!