Сравнительные характеристики тестов для обеспечения инфекционной безопасности клеток 1© ЗАО «Биоград», 2011 г. к. х. н. Дробченко С.Н., д. м. н. Рищук С.В. ЗАО «Биоград», С-З медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт- Петербург

Приказ Минздравсоцразвития 325 от «О развитии клеточных технологий в Российской Федерации» Образец стволовых клеток должен тестироваться на наличие в нём: антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, антигена ВИЧ-1, антител к HTLV I и II, антител к HBcAg, антигена HBs, антител к HCV, антител к CMV, антител к Toxoplasma gondii © ЗАО «Биоград», 2011г.

Алгоритм тестирования (СП ) «Стандартным методом лабораторной диагностики ВИЧ- инфекции служит определение антител/антигенов к ВИЧ с помощью ИФА» Тестирование на ВИЧ зараженность затруднено тем, что вирусные антитела появляются в определяемом аналитическом количестве только через 2 недели после заражения. © ЗАО «Биоград», 2011г.

ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 ТриСпот Аг-Ат Планшетные ИФА тест-системы не дифференцируют результаты по антигену и антителам, дают единый ответ о наличии ВИЧ-инфекции. Отличительным качеством четвертого поколения бесприборных ИФА тест-систем «ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 ТриСпот Аг-Ат» является дифференцированное определение антигена ВИЧ 1 p24 и антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Это позволяет надежно определять наличие ВИЧ инфекции даже в период окна, что повышает безопасность клеточных трансплантатов. © ЗАО «Биоград», 2011г.

Бесприборные ИФА тест-системы ИммуноКомб © ЗАО «Биоград», 2011г. Наименование ИФА тест- систем ИммуноКомб II Определяемый показатель Чувствительность/ специфичность HIV1&2 BiSpot Антитела к ВИЧ1 и ВИЧ2 (отдельно) 99,7% / 100% HIV 1&2 CombFirm Рекомбинантный иммуноблот, выявляет спектр антител 99,7% / 100% HIV 1&2 TriSpot Ag-Ab Отдельно антитела к ВИЧ1, ВИЧ2 и антиген ВИЧ1 р % / 99,5% HTLV I&II Антитела к Т-лимфотропному вирусу человека 100% / 97% CMV IgG IgG-антитела к ЦМВ (количественно) 94,6% / 99,5% CMV IgM IgM-антитела к ЦМВ 98,8% / 98,2% HCV IgG-антитела к вирусу гепатитаС, отдельно Core и NS3-NS5 94,6% / 99,5% HBsAg 90 Поверхностный антиген вируса гепатита В 98,8% / 98,2% Anti-HBs Антитела к HBsAg (количественно) 100% / 98,3% HBc IgG IgG-антитела к коровому антигену гепатита В 100% / 99,1% Toxo IgG IgG-антитела к Токсоплазме (количественно) 97,2% / 93,8% Toxo IgM IgM-антитела к Токсоплазме 93,3% / 100%

Бесприборные ИФА тест-системы ИммуноКомб Чувствительность и специфичность соответствует планшетному ИФА Используется фосфатазно-щелочной конъюгат Внутренний контроль в каждом тесте (верхняя точка) Отдельные точки для разных маркеров – информативность результата выше Французское агентство по контролю за медикаментами (ADA), оценивая тесты, разрешенные для использования в клиниках Европы, подчеркивает, что использование фосфатазно-щелочного конъюгата позволяет достичь наиболее высокой чувствительности по сравнению с тестами, основанными на пероксидазной реакции. © ЗАО «Биоград», 2011г.

Бесприборные ИФА тест-системы ИммуноКомб В отличие от планшетных ИФА тест-системы ИммуноКомб позволяют проводить как индивидуальное, так и групповое тестирование. Высокотехнологичная методика производства ИммуноКомб обеспечивает единую схему анализа для всех определяемых инфекционных агентов, варьируя количество исследуемого образца, длительность и температуру инкубации. Единая схема проведения анализа для всех тест-систем ИммуноКомб упрощает процесс подготовки персонала и позволяет избежать ошибок, что особенно важно при обследовании клеточных трансплантатов. © ЗАО «Биоград», 2011г.

Бесприборные ИФА тест-системы ИммуноКомб Разработаны в Институте Пастер в Париже, запатентованы фирмой Орженикс, поэтому аналогов не существует Имеют торговую марку ИммуноКомб и выполнены в оригинальном формате ИммуноГребней Такой формат с твердой фазой ИФА анализа, расположенной на зубцах полимерного Гребня, позволяет переносить твердую фазу между растворами реагентов, необходимых для проведения ИФА Все необходимые реагенты: разбавитель образца, промывочные растворы, конъюгат, помещены производителем в лунки планшеты (Проявочной Ванны) © ЗАО «Биоград», 2011г.

9 Типовой состав набора ИммуноКомб

© ЗАО «Биоград», 2011г.10 Схема постановки анализа 6. Результат анализа в виде окрашенных точек. Верхняя точка - внутренний контроль. Нижняя точка и (или) средняя точки появляются в случае наличия антител или антигенов. 1. Для индивидуального тестирования гребень можно согнуть и отломить необходимое количество зубцов. 2. В ряд А проявочной ванны вносятся образцы (сыворотка, плазма или цельная кровь) и контроли. 3. Гребень вставляется в ряд А и инкубируется (реакция антиген-антитело). 4. Гребень перемещается из ряда в ряд проявочной ванны в соответствии с инструкцией (промывки и связывание с конъюгатом). 5. Цветная реакция в ряду F.

© ЗАО «Биоград», 2011г. 11 Диагностика вирусных гепатитов ИммуноКомб HBsAg ИммуноКомб Anti-HBsAg ИммуноКомб HBc IgM ИммуноКомб HBc IgG ИммуноКомб HCV ИммуноКомб HAV IgM ИммуноКомб HAV Ab NS3 и NS4 NS5 Коровый антиген ВГС Внутренний контроль

© ЗАО «Биоград», 2011г.12 Результаты испытаний тест-систем на сероконверсионной панели HIV 9017, Bioclinical Partners, США ИФА(ELISA) планшетные тест-системы (Данные производителя панели) Отчет о сравнительных испытаниях МЗ РФ , таблица 24 образца Дата забора образца Abbott AxSYM Anti- HIV1/2 Organon Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ab Roche Enzymum -Test HIV Combi Abbott Architect HIV Ag/Ab Combo Serodia HIV-1/2, ИХА ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 БиСпот, ИФА Genie II HIV-1/HIV-2, ИХА Детермин ВИЧ ½, ИХА Ретрочек ВИЧ ИХА ,310,470,230, ,310,500,230, ,390,480, ,400,520,250, ,680,570, ,930,690,570, ,01 0,62 1,401, ,43 0,80 1,961, ,231,083,172, ,511,453, ,121,704,435,

Результаты испытаний тестов ИФА тест-система ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 БиСпот выявляют антитела к ВИЧ на дней раньше, чем экспресс-тесты, основанные на принципе иммунохроматографии на дней опережают ИФА планшетные тест- системы известных зарубежных производителей © ЗАО «Биоград», 2011г.

14 Испытания ВОЗ БПТ для выявления HBs Ag

© ЗАО «Биоград», 2011г. 15 Результаты испытаний ВОЗ ИммуноКомб выявляет HBs Ag в ранних образцах сероконверсионной панели, опережая на 8-31 день экспресс-тесты, основанные на иммунохроматографии на 2-26 дней ELISA референс-тесты: Hepanostika HBsAg Uni-Form II(Organon Teknika) и Monolisa Ag HBs Plus (Bio-Rad)

Бесприборные ИФА тест-системы ИммуноКомб Разрешены Минздравсоцразвития для: обследования доноров крови, органов и тканей человека, скрининговых исследований, подтверждения результатов скрининговых исследований (приказ 292 от , 322 от , 336 от ) В годах в рамках Приоритетного национального проекта в сфере здравоохранения тесты ИммуноКомб® II ВИЧ 1+2 БиСпот поставлялись в медицинские учреждения России. © ЗАО «Биоград», 2011г.

Бесприборные ИФА тест-системы ИммуноКомб Сертифицированы СЕ и широко используются более чем в ста странах мира. Отобраны для программ ВОЗ, UNAIDS, Красного Креста, допущены FDA (США) для поставок по специальным программам фонда Клинтона © ЗАО «Биоград», 2011г.

18 Технология ИммуноКомб позволяет диагностировать широкий спектр инфекций: ВИЧ HTLV Гепатиты А, В, С Цитомегалию Токсоплазмоз Хламидиоз Краснуху Хеликобактериоз Тропические инфекции

© ЗАО «Биоград», 2011г. 19 «Быстрые простые методы в диагностике заболеваний TORCH- комплекса»

© ЗАО «Биоград», 2011г. 20 Методические рекомендации и руководства для врачей

ЗАКЛЮЧЕНИЕ Лабораторный скрининг на наличие инфекционных агентов становится доступнее для всех учреждений здравоохранения при внедрении бесприборной методики ИФА. Применение бесприборных ИФА тест-систем позволит уменьшить процент утилизации образцов стволовых клеток после заготовки их в лечебных учреждениях, удаленных от специализированных лабораторий, оснащенных дорогостоящим оборудованием. Это сделает заготовку образцов стволовых клеток экономически более эффективной во всех населенных пунктах России, что расширит возможности по созданию сети государственных и частных банков стволовых клеток на территории Российской Федерации. © ЗАО «Биоград», 2011г.

22© ЗАО «Биоград», 2011г. ЗАО «Биоград» 19 лет в России. Адрес:197101, г. Санкт-Петербург, Петровский пр., д. 14, 19-Н тел./факс:(812) , (многоканальные) Спасибо за внимание.