ЗЯСУВАННЯ МОЖЛИВОСТІ ЗБЕРЕЖЕННЯ АНТИОКСИДАНТНОЇ ТА ПРОТИЗАПАЛЬНОЇ ДІЇ ЕКСТРАКТІВ ПЛАЦЕНТИ ТА ЇХ ОКРЕМИХ ФРАКЦІЙ НА СУСПЕНЗІЯХ ЕРИТРОЦИТІВ, ТРОМБОЦИТІВ ТА ДРІЖДЖІВ S. СEREVISIAE ПІСЛЯ ЗАМОРОЖУВАННЯ- ВІДІГРІВУ ПЛАЦЕНТИ І ЇЇ ЕКСТРАКТІВ

МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ Матеріалом досліджень служили водно–сольові екстракти та окремі фракції плаценти людини Методи: Гель-хроматографія Спектрофотометрія - вміст білків - антиоксидантні властивості - визначення відносного вмісту метгемоглобіну в еритроцитах - дихальна активність дріжджів ЕПР - оцінка стану цитозолю еритроцитів - дихальна активність дріжджів Хемілюмінесценці

Вплив свіжоотриманих ЕПЛ і окремих фракцій на вміст метгемоглобіну в еритроцитах з нітритом натрію. Нітрит здатен проникати крізь мембрану еритроцитів та взаємодіяти з оксигемоглобіном, перетворюючи його на мет-форму. Показано що, при попередній експозиції еритроцитів з екстрактами плаценти людини та їх фракціями вони проявляють захисну дію по відношенню до окисного стресу еритроцитів викликаного нітритом натрію, що проявляється у відносному вмісті метгемоглобіну в еритроцитах.

Попередня експозиція еритроцитів з цільними ЕПЛ і їх фракціями дозволяє зберегти структурно-динамічний стан цитозолю еритроцитів більш близьким до контролю Вплив ЕПЛ на рухливість спін-зонду в цитозолі еритроцитів в умовах окисного стресу, викликаного нітритом натрію: – контроль, – після експозиції з нітритом натрію, – після одночасної експозиції з нітритом натрію та ЕПЛ Вплив ЕПЛ і окремих фракцій на рухливість спін- зонду в цитозолі еритроцитів в умовах окисного стресу, викликаного нітритом натрію: – контроль; – еритроцити+12 кДа+нітрит – еритроцити+ЕПЛ+нітрит; Δ – еритроцити+65 кДа+нітрит; – еритроцити+5 кДа+нітрит; – еритроцити+нітрит

Вміст метгемоглобіну в еритроцитах в умовах окисного стресу під дією нітриту натрію Вплив попередньої експозиції з ЕПЛ на еритроцити в умовах окисного стресу, викликаного нітритом натрію та перекисом водню Рівень гемолізу еритроцитів в умовах окисного стресу під дією перекису водню Встановлено, що заморожування до -20˚С або до -196˚С і наступний відігрів плаценти зберігають властивості отриманих із них екстрактів захищати еритроцити від окисного стресу на високому рівні

Показано, що як свіжоотримані ЕПЛ так екстракти отримані із плаценти після її заморожування до -20˚С або -196˚С, знижують дію перекису водню на дріжджі S. cerevisiae, захищаючи їх від впливу окисного стресу. Дослідження впливу експозиції з ЕПЛ на дихальну активність S. cerevisiae в умовах окисного стресу, викликаного перекисом водню Відновлення спін-зонду ТЕМПОН в суспензії S. сerevisiae: – контроль; – H 2 O 2 (10 мМоль/л); – попередня експозиція з ЕПЛ після заморожування. Дихальна активність дріжджів S. cerevisiae під дією перекису водню

Дихальна активність дріжджів S. Cerevisiae під дією нітриту натрію Дослідження впливу експозиції з ЕПЛ на дихальну активність S. cerevisiae в умовах окисного стресу, викликаного нітрітом натрію Показано, що як свіжоотримані ЕПЛ так і екстракти отримані із плаценти після її заморожування до -20˚С або - 196˚С, знижують дію нітриту натрію на дріжджі S. cerevisiae, захищаючи їх від впливу окисного стресу.

Індукована АДФ агрегація тромбоцитів у ЗТП при попередній експозиції з ЕПЛ та окремими фракціями ЕПЛ із: (А) свіжоотриманої, (Б) замороженої до –196°C, (В) замороженої до – 20°C плаценти; * – статистично значуща різниця по відношенню до контролю, p < 0,05 (n=6) Вплив ЕПЛ та їх окремих фракцій на агрегацію тромбоцитів А Б В

Пригнічення агрегації тромбоцитів у ЗТП фракціями ЕПЛ та цільними ЕПЛ із: (А) свіжоотриманої плаценти, (Б) замороженої до –196°C плаценти, (В) замороженої до – 20°C плаценти; * – статистично значуща різниця по відношенню до контролю, p < 0,05 (n=6) Вплив ЕПЛ та їх окремих фракцій на агрегацію тромбоцитів АБ В

Встановлено, що попередня експозиція еритроцитів з ЕПЛ викликає підвищення термостійкості еритроцитів на 18,7±1,9 % відносно контролю. Показано, що більшості фракцій свіжоотриманих ЕПЛ притаманна здатність знижувати температурно-індукований гемоліз еритроцитів. Термогемоліз еритроцитів * – статистично значуща різниця по відношенню до контролю, p < 0,05 (n=9) Відсоток зниження термогемолізу еритроцитів фракціями ЕПЛ зі свіжоотриманої плаценти; * – статистично значуща різниця по відношенню до цільного ЕПЛ, p < 0,05 (n=9) Вплив ЕПЛ та їх окремих фракцій на термогемоліз еритроцитів

Вплив заморожування-відігріву екстрактів на зниження температурно-індукованого гемолізу еритроцитів екстрактами та окремими їх фракціями : (А) заморожування до –196°C, (Б) заморожування до – 20°C * – статистично значуща різниця по відношенню до контролю, p < 0,05 (n=6) АБ Вплив ЕПЛ та їх окремих фракцій на термогемоліз еритроцитів Показано, заморожування-відігрів ЕПЛ зберігають здатність екстрактів та їх фракцій знижувати температурно-індукований гемоліз еритроцитів. Встановлено, що найбільший ефект проявляє фракція ЕПЛ з молекулярною масою кДа.

Відсоток зниження термогемолізу еритроцитів екстрактами та окремими їх фракціями із: (А) свіжоотриманої плаценти, (Б) замороженої до –196°C плаценти, (В) замороженої до – 20°C плаценти; * – статистично значуща різниця по відношенню до контролю, p < 0,05 (n=9) АБ В Вплив ЕПЛ та їх окремих фракцій на термогемоліз еритроцитів Попереднє заморожування плаценти зберігає пригнічувальну дію ЕПЛ та їх фракцій по відношенню до термогемолізу еритроцитів.