МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное образовательное учреждение высшего образования «БРЯНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ.

Презентация:



Advertisements
Похожие презентации
Теоретические основы полимеразной цепной реакции.
Advertisements

Полимеразная цепная реакция Генерозова Анна, 9 класс «А»
ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ
Министерство образования науки Российской Федерации.
Некоторые методы молекулярной биологии Дей Е.В.. Полимеразная цепная реакция Принцип ПЦР сформулировал Гобинд Корана в 1971 В 1983 Кэри Мюллису удалось.
Некоторые методы молекулярной биологии Денис Ребриков.
Кафедра теории и методики гандбола ВЫПУСКНАЯ КВАЛИФИКАЦИОННАЯ РАБОТА на тему: «Отлчительные особенност скоостно – силовой подотовленности гандболсток в.
Министерство образования и науки Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Новгородский.
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования > Министерства здравоохранения Российской Федерации.
Министерство образования и науки Российской Федерации Саратовский государственный социально-экономический университет.
Министерство образования и науки Российской Федерации ФГАОУ ВО СЕВЕРО-ВОСТОЧНЫЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ имени М.К.АММОСОВА» Автодорожный факультет Кафедра.
Синтез ДНК. Полимеразная цепная реакция. ЛЕКЦИЯ 5.
Информация о компании ЗАО «НПФ ДНК-Технология» Основана в 1993 году Специализация: производство оборудования и реактивов для ПЦР, лабораторная диагностика.
ПЦР – метод амплификации, т.е. получения большого числа копий нужного гена или его фрагмента в условиях in vitro. Реакционная смесь для получения нужной.
Министерство образования и науки Российской Федерации федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования.
Содержание: Что такое «библиотека генов?» Этапы создания геномов библиотек Скрининг геномных библиотек Банк генов Способы получения фрагментов ДНК, на.
Wet Lab Смирнов Арсений Пензенцева Евгения. ДНК (4 нуклеотида: А, Т, G, C) 3.
РУДН. Кафедра биологии и общей генетики Лекция РУДН. Кафедра биологии и общей генетики Гигани Ольга Олеговна Лекция Синтез ДНК. Нарушения в структуре ДНК.
МИНИСТЕРСТВО СПОРТА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ «Российский государственный.
МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ УКРАИНЫ Национальный технический университет Украины Факультет биотехнологии и биотехники; Институт молекулярной биологии.
Транксрипт:

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное образовательное учреждение высшего образования «БРЯНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ АКАДЕМИКА И.Г. ПЕТРОВСКОГО» ЕСТЕСТВЕННО-НАУЧНЫЙ ИНСТИТУТ ЕСТЕСТВЕННО-ГЕОГРАФИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТА КАФЕДРА ХИМИИ Курсовая работа: ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ИОНОВ МАГНИЯ НА ПРОВЕДЕНИЕ ISSR-PCR С IS3 ПРАЙМЕРОМ Направление подготовки Химия Профиль подготовки Аналитическая химия Выполнила: студентка 1 курса 5 группы очной формы обучения Симоненко Е.Н. Научный руководитель: Заякин В.В. проф., д.б.н. Брянск 2017

Цель: изучить влияние разных концентраций MgCl 2 на проведение ISSR-ПЦР. Задачи: подготовить литературный обзор по теме курсовой работы; научиться выделять ДНК и проводить электрофорез в агарозном геле; освоить методику проведения ISSR-ПЦР; оценить влияние разных концентраций ионов магния на ход ISSR-ПЦР.

Полимеразная цепная реакция Каждый цикл ПЦР состоит из следующих этапов: Денатурация Отжиг Элонгация

Inter-microsatellite-PCR ISSR-PCR - это амплификация участков ДНК, фланкируемых микро сателлитами. В результате ISSR-ПЦР амплифицируется большое число фрагментов, представленных на электрофореграмме дискретными полосами.

Компоненты ПЦР Вода деионизированная 10X полимеразный буфер MgCl 2 dNTP Mix ISSR-праймер Taq ДНК-полимеразу Dream Геномная ДНК

Используемые концентрации ионов магния п/п концентрация MgCl 2 1 эксперимент 125 ммоль 25 ммоль 30,5 ммоль 40,05 ммоль п/п концентрация MgCl 2 2 эксперимент 10,25 ммоль 20,5 ммоль 35 ммоль 410 ммоль 520 ммоль

Результаты М - ДНК-маркер 100 bp Kb (11 фрагментов от 100 до 1500 bp); 1 – концентрация ионов Mg2+ 25 ммоль; 2 - концентрация ионов Mg2+ 5 ммоль; 3 - концентрация ионов Mg2+ 0,5 ммоль; 4 - концентрация ионов Mg2+ 0,05 ммоль; 5 - концентрация ионов Mg2+ 0,25 ммоль; 6 - концентрация ионов Mg2+ 0,5 ммоль; 7 - концентрация ионов Mg2+ 5 ммоль; 8 - концентрация ионов Mg2+ 10 ммоль; 9 - концентрация ионов Mg2+ 20 ммоль.

Выводы 1. Собрана и проанализирована литература по механизмам, условиям проведения ПЦР и роли ионов магния в этой реакции. 2. Освоены методики выделения ДНК CTAB методом, горизонтального электрофореза ДНК в агарозном геле и методика проведения ISSR- PCR. 3.Установлено, что при проведении ПЦР с Taq ДНК полимеразой и праймером IS3 оптимальная концентрация ионов магния составляет 5 мМ.

Спасибо за внимание!