Лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний Выполнила: Жиенбеков М.С. Группа: ВОП-601/1

План Введение Основная часть: Классификация АЗ Виды аутоантител и методы диагностики Заключение

Органоспецифические Аутоантитела индуцируются против одного или группы компонентов одного органа. Тиреоидит Хасимото, первичная микседема, тиреотоксикоз, пернициозная анемия, аутоиммунный атрофический гастрит, болезнь Адисона, гранулематоз Вегенера, инсулинонезависимый диабет. Неорганоспецифические Аутоантитела реагируют с разными тканями данного или даже другого вида организма, например антинуклеарные антитела. Системная красная волчанка, дерматомиозит, склеродермия, ревматоидный артрит, синдром Шегрена. Смешанные Включают оба вышеперечисленных механизма Первичный билиарный цирроз, хронический активный гепатит, язвенный колит, глютеновая энтеропатия, синдром Гудпасчера, аутоиммунная гемолитическая анемия, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, идиопатическая лейкопения, рассеянный склероз.

Спектр аутоиммунных заболеваний

Типы аутоиммунных заболеваний

группа заболеваний, обусловленная антителами к антигенам собственных клеток или межклеточного матрикса; заболевания, вызванные патогенным действием иммунных комплексов – аутоантител с антигенами организма; заболевания, причиной которых являются аутоантиген-специфические Т-клетки

Патогенез аутоиммунных процессов Аутоантитела – причина патологического процесса. Аутоантитела образуются вследствие повреждения тканей, вызванного тем или иным патологическим процессом. Существует некий третий фактор, который лежит в основе и повреждения ткани, и появления аутоантител (повреждение ткани – ИМ, инфекции, лекарства, стресс).

Патогенное действие аутоантител 1. Тиреотоксикоз. 2. Злокачественная миастения. 3. Мужское бесплодие. 4. Пернициозная анемия. 5. Синдром Гудпасчера. 6. Заболевания крови – аутоиммунная гемолитическая анемия, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура. 7. АФС.

Тиреотоксикоз – действие аутогантител к гормональным рецепторам, имитирующих функцию гормонов ЩЖ. Мужское бесплодие – антитела к сперматозоидам обусловливают их склеивание в сперме. Пернициозная анемия – аутоантитела препятствуют нормальному всасыванию витамина В12. Синдром Гудпасчера – связывание антител с базальной мембраной капилляров почечных клубочков. АФС – взаимодействие аутоантител с комплексом кардиолипин-β2-гликопротеин 1.

Патогенное действие иммунных комплексов СКВ – причиной реакций гиперчувствительности 111 типа служат иммунные комплексы, которые состоят из ДНК и антител и откладываются в почках, коже, суставах и сосудистых сплетениях. У лиц с генетическими дефектами в системе активации комплемента выведение им.комплексов из крови замедлено, что обусловливает особую предрасположенность к развитию СКВ. Ревматоидный артрит – эрозия хрящей и костей обусловлена действием макрофагов и фибробластов, стимулированных цитокинами (их продуцируют активированные Т-клетки) и иммунными комплексами, образующимися в результате сильной иммунологической реакции в синовиальной ткани.

Аутоиммунные процессы стимулируются антигеном На роль антигена в селекции и появлении аутореактивных В-клеток, указывает появление высокоаффинных аутоантител, которые образуются в результате соматического гипермутирования. О значении антигена говорит и то, что аутоантитела направлены против разных эпитопов одного и того же аутоантигена. Развитие аутоиммунного заболевания облигатно зависит от Т-клеток. При органоспецифических заболеваниях Т- клетки реагируют на антигены из органов, подвергающихся иммунной атаке.

1. Подтверждения того или иного заболевания (диагностическое значение). 2. Тесно связано с активностью болезни. 3. Прогностическое значение.

Заболевания Встречаемость антиядерных антител % Системная красная волчанка (СКВ) 95 Ситемный склероз (CC) 95 Синдром Шегрена (СШ) 95 Дерматомиозит, полимиозит (ДМ/ПМ) Смешанные заболевания соединиительной ткани (СЗСТ) 100 Дискоидная красная волчанка Локализованная склеродермия 50 Ревматоидный артрит Юношеский ревматоидный артрит 50-60

Заболевания Встречаемость антиядерных антител % Аутоиммунный гепатит Первичный билиарный цирроз Узелковый полиартериит Злокачественные заболевания Хроническое невынашивание беременности Пожилые 10 Здоровые 5

1. истинные ядерные: двухспиральная ДНК, односпиральная ДНК, гистоны, ядерная РНК 2. экстрагируемые ядерные: Sm, n-RNP, Scl 70 (топоизомераза I) 3.цитоплазматические: SS-A (Ro), SS-B (La) и Jo-1 (гистидил-тРНК- синтетаза). SS-A (Ro) и SS-B (La) могут локализоваться как в цитоплазме, так и в ядрах.

Непрямая иммунофлуоресценция Иммуноферментный анализ Иммуноблотинг Двойная иммунодиффузия и контр электрофорез

Тип свечения Специфичность антитела Заболевание Гомогенный/периферический ДсДНК ГистоныСКВ Лекарственная СКВ Периферический Ламины ядра Аутоиммунный гепатит Крупногранулярный Sm RNP CKB CKB, CЗСТ Мелкогранулярный Ro/SS-A La/SS-B Scl-70 СШ, СКВ СС Центромерный Центромера ВCREST Ядрышковый Белки ядерного матрикса 70 и 80 к Да СКВ Цитоплазматический Jo-1ПМ/ДМ

СКРИНИНГ АНТИЯДЕРНЫХ АНТИТЕЛ МЕТОДОМ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА (ELISA) %-вероятность, что пациент не страдает СКВ, ЛКВ, СШ, СЗСТ, склеродермой,полимиозитом, синдромом CREST СКВ/ЛКВ СКВ RNP Sm SS-A SS-B Scl-70 Jo-1 скрининговый тест на экстрагируемые ядерные антитела (ИФА): СКВ/СШ/СЗСТ СКВ/ЛКВ СКВ/СШ/РА СКВ/СШ ПСС/ CREST полимиозит анализ антител к dsDNA (ИФА) анализ антигистоновых антител (ИФА)

Тест Комментарий Антитела к дсДНК При эффективной и успешной терапии титр значительно снижается. Ежемесячный мониторинг их концентрации в крови позволяет предсказать надвигающийся рецидив заболевания и агрессивная терапия улучшает долгосрочный прогноз Антитела к осДНК Могут быть обнаружены у больных с поражением почек в отсутствии других типов аутоантител. Титр снижается при эффективном лечении Антитела к рибонуклеопротеинам (Sm, RNP, Ro/SS-A и La/SS-B) Обычно имеются высокие титры, которые не изменяются при терапии СКВ. Мониторинг не имеет клинического значения, но конкретный спектр АЯА указывает на особенность клинических проявлений СКВ

Новый иммунологический маркер в диагностике СКВ 16-30% больных СКВ имеют антитела к нуклеосоме, в то время как антитела к дсДНК и антитела к гистонам отсутствуют.

Анти- dsDNA Анти- ssDNA Анти- гистон Анти-SS- A(Ro Анти-SS- B(La) Анти- Sm Анти- RNP/ Sm Анти- Scl 70 Анти- Jo-1 Системная красная волчанка (СКВ) > Лекарственна я красная волчанка (ЛКВ) Синдром Шарпа / Смеш. Забол-я соедини. ткани > 90 Ревмат. артрит Синдром Шегрена > 90 Склеродерма > 90 Светочувствит ельные дерматиты,

Частота выявления ревматоидного фактора, % Аутоиммунные заболевания Синдром Шегрена Ревматоидный артрит Полимиозит СКВ Эссенциальная смешанная криоглобулинемия Ювенильный ревматоидный артрит Анкилозирующий спондилит Артриты при хронических воспалительных заболеваниях кишечника Псориатический артрит Другие воспалительные заболевания Идиопатический фиброзирующий альвеолит Инфекционный эндокардит Хронический активный гепатит Цирроз печени Здоровые лица Моложе 60 лет Старше 80 лет 5 30

Заболевание Антитела к ТПО и ТГ Зоб Хашимото(гипертрофический вариант АИТ) % Первичная микседема (атрофический вариант АИТ) 90%(недавняя) 60-70% (давняя) Диффузный токсический зоб 70% к ТПО 40% к ТГ Хаши-токсикоз 100% Диффузный или узловой нетоксический зоб 20-25% Узловой токсический зоб 20-35% Рак щитовидной железы 20-35% Здоровые лица варьируют с возрастом

Сахарный диабет I типа. Генетические маркеры. В настоящее время обнаружено 19 локусов, связанных с диабетом 1 типа. Наиболее тесно связан с диабетом локус на хромосоме 2. СД I типа (высокий риск) – с HLA DQA1*0301, DQB1*0302 Серологические маркеры. 1. Антитела к клеткам островков Лангерганса (ICA). 2. Антитела к инсулину. 3. Декарбоксилаза глутаминовой кислоты (GAD). Группа риска Сахарный диабет II типа Пациенты с генетической предрасположенностью Больные с симптомами: -Гипергликемия -Ожирение -Эссенц. гипертония -Дислипидемия -ССЗ -Нефропатия Пациенты с панкреатитом, гипертиреозом, акромегалией, феохромоцитомой Пациенты, длительно получающие гормональную терапию (эстрогены, диуретики, кортикостероиды)

Названия аутоантител Антиген Частота выявления в доклиническом периоде СД I типа Максимальные сроки обнаружения доклинического проявления СД I типа, годы Аутоантитела к клеткам островков Лангерганса (ICA) Цитоплазматически е антигены клеток островков Лангерганса 60-80%12 Аутоантитела к инсулину Инсулин, проинсулин 30-60%8 Аутоантитела к декарбоксилазе глутаминовой кислоты Декарбоксилаза глутаминовой кислоты 80-95%15 Аутоантитела к фосфотирозинфосф отказе (IA-2) Фосфотирозинфосф таза секреторных гранул -клеток 70-90%15

Отсутствие всех маркеров – 0% Один маркер -20% Два маркера -44% Три маркера -100% На основании обнаружения антител у родственников больных СД I типа проводят первичную профилактику СД I типа.

Васкулиты – это группа заболеваний в основе патогенеза которых лежит воспаление сосудистой стенки. ANCA (антинейтрофильные цитоплазматические антитела) – комплекс антител, специфичных к различным гранулоцитарным, моноцитарным и, возможно, эндотелиальным цитоплазматическим антигенам. Существуют 2 подкласса аутоантител к нейтрофилам человека: с-ANCA и р-ANCA. Наиболее значимыми из с-ANCA и р-ANCA антител являются ферменты первичных гранул: протеиназа-3 (РR3) и миелопероксидаза (МРО) соответственно.

Вид антител Заболевание Анти-MPO ANCA Васкулиты, микроскопический полиангиит, синдром Черджа- Стросса, ревматоидный артрит, системная красная волчанка Анти-PR3 ANCA Грануломатоз Вегенера Анти-BPI ANCA Хронические инфекционные болезни, Анти-эластаза ANCA болезнь Крона, язвенный колит Анти-катепсин G ANCA Эмфизема, ревматоидный артрит, Анти-лизоцим ANCA воспалительные ревматические болезни Анти-лактоферрин ANCA Воспалительные ревматические болезни, системная красная волчанка,

Вызывают прогрессирующий гломерулонефрит без или с кровоизлиянием в легкие (синдром Гудпасчера). Титры аутоантител коррелируют с активностью процесса, поэтому их определение используют для мониторинга болезни.

Отрицательно заряженные фосфолипиды мембран тромбоцитов и эндотелия, к которым вырабатываются аутоантитела: кардиолипин (АКЛ) фосфатидилинозитол (АФИ) фосфатидилсерин (АФС) фосфатидилхолин (АФХ) фосфатидиловая кислота (АФК ) Протромбин, 2-гликопротеин I, низко– и высокомолекулярный кининогены и ряд других, служат кофакторами, в присутствии которых фосфолипиды связываются с аутоантителами.

Антитела Частота выявления, % IgG39-44 IgA17-57 IgM5-33

Антимитохондриальные антитела (AMA) – гетерогенная группа аутоантител против различных белков, расположенных на внутренней и наружной мембран митохондрии. Их основные антигены находятся в тканях. Антимитохондриальные антитела - М2 имеют диагностическое значение для первичного билиарного цирроза - хронического заболевания печени, протекающего с воспалением и обструкцией внутрипеченочных желчных протоков, циррозом и развитием печеночной недостаточности.

Аутоиммунные гепатиты (АИГ) Тип АИГАутоантитела Частота встречаемости aутоантител у больных АИГ (%) Тип 1Антиядерные антитела (ANA) Антитела к гладкой мускулатуре (SMA) Тип 2Антинейтрофильные антитела p-типа (р-АNCA) Тип 3Антитела к микросомам печени и почек I типа (LKM-1) 30 Аутоимунный гепатит – хроническое воспалительное заболевание печени неизвестной этиологии, характеризующееся перипортальным или более обширным воспалением и протекающее со значительной гипергаммаглобулинемией и появлением в сыворотке широкого спектра антител.

Аутоиммунные заболевания нервной системы Антитела к миелинассоциированному гликопротеину - хронические демиелинизирующие нейропатии - контроль иммуносупрессивной терапии Антитела к ганглиозиду М 1 - мультифокальная моторная нейропатия - синдром Гийена-Барре - заболевание проксимальных нижних мотонейронов Антитела к ганглиозиду D1b - сенсорные нейропатии - синдром Гийна-Барре Антитела к ганглиозиду Q 1b - синдром Миллера-Фишера синдром Гийена-Барре с офтальмоплегией

АУТОИММУННЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ, СВЯЗАННЫЕ С СИСТЕМОЙ СВЕРТЫВАНИЯ Тромбоцитопеническая пурпура (недостаток активности ADAMTS-13) Ангионевротический отек Квинке (сниженная антивность С1-ИНГИБИТОРА) АНТИФОСФОЛИПИДНЫЙ СИНДРОМ (наличие аутоантител к фосфолипидам и кофакторным белкам)

Использованная литература Medportal.ru