Репликация Синтез ДНК по матрице ДНК
Принципы репликации 1. Матричный 2. Комплементарный 3. Полуконсервативный 4. Униполярный и антипараллельный 5. Прерывистый 6. Потребность в праймере 7. Недорепликация тело мерных концов
1. Комплементарность
Новая цепь Старая цепь 4. Полуконсервативность
2. Антипараллельность 3. Униполярность
Лидирующая цепь Запаздывающая цепь РНК-затравка Брешь от удаленной затравки Фрагменты Оказаки 5. Прерывистость
Топологичепские проблемы репликации
SSB –белки Альбертса (1968 г) –single strand binding Геликазы – связываются с одноцеп ДНК. Им нужна площадка посадки Топоизомеразы – гиразы и релаксазы Гиразы – узнают опред послед ДНК и делают разрывы в ДНК, в АТ-богатых участках. Это и есть ori = 245 п.н.
Глаз репликации Репликационный глазок
Лидирующая цепь Запаздывающая цепь Димер ДНК-полимеразы Топоизомераза SSB-белки Праймаза Геликаза Праймер Фрагмент Оказаки
Фазы репликации 1. Сигнал для репликации. S- фаза цикла 2. Расплетание двойной цепи – геликазы, топоизомеразы I и II ( гираза) 3. Образование глазков и репликационных вилок. Стабилизация их белками 4. Образование праймера с помощью РНК-полимеразы 5. ДНК-полимераза наращивает новую цепь нуклеотидов в направлении По лидирующей цепи репликация идет непрерывно, по отстающей - фрагментами
ДНК- полимераза 1. Наращивает цепь нуклеотидов. Ей необходим для этого спаренный 3-конец 2. Гидролизует прежний праймер 3. Осуществляет правку
Репликационная машина 1.ДНК- полимераза 2. Праймаза 3. Геликазы 4. Дестабилизирующие белки 5.ДНК-лигаза 6. Топоизомеразы 7. Инициирующие белки в точках ориджин 8.теломераза
ДНК-полимераза сама осуществляет правку при репликации 1. Неправильный нуклеотид обладает низкой аффинностью к ДНК-полимеразе и во время ее конформационных превращений отщепляется 2. Экзонуклеазная правка – подстановка неправильного нуклеотида дает неспаренный 3 OH конец, а он не годится как праймер для дальнейшей элонгации Ошибки при репликации 1:10 9 Ошибки при транскрипции – 1:10 4
Матрица Однонитевая ДНК Топоизомераза создает частично расплавленные участки
Матрица Однонитевая ДНК Топоизомераза создает частично расплавленные участки Геликаза разрывает водородные связи SSB-белки стабилизируют однонитевое состояние ДНК
Материнская нить Дочерняя нить Репликативная вилка
Лидирующая цепь Запаздывающая цепь Димер ДНК-полимеразы Топоизомераза SSB-белки Праймаза Геликаза Праймер Фрагмент Оказаки
РНК Конец молекулы недореплицирован Теломераза
3 5 Теломерные повторы ГГГТТАГ
3 5 Теломераза Теломерные повторы ГГГТТАГ Теломераза …ЦЦЦААУЦ ЦЦЦААУЦ 53
Теломераза 3 Удлинненная теломера Затравка Лигаза
Теломераза 3 5 Затравка
Теломераза