Полимеразная цепная реакция Генерозова Анна, 9 класс «А»
Полимеразная цепная реакция – способ увеличения количества определённых фрагментов ДНК. ДНК – Как носитель информации ПЦР – способ «увеличить» число фрагментов ДНК Напечатанный текст – как носитель информации Ксерокопирование – способ «увеличить» число фрагментов текста до ПЦР после ПЦР
Что происходит в ходе ПЦР Все происходит в пробирке: Компоненты: Исследуемая ДНК Фермент ДНК-полимераза – она синтезирует ДНК Праймеры или затравки (короткие искусственные фрагменты ДНК) – они показывают откуда надо синтезировать ДНК Нуклеотидтрифосфаты – это строительный материал для синтеза Нужен прибор, который поддерживает нужную температуру в пробирке и быстро ее меняет - амплификатор или программируемый термостат.
Компоненты ПЦР реакции
Этапы ПЦР Полимеразная цепная реакция состоит из множества циклов. Каждый цикл состоит из 3-х этапов. 1-й цикл – Этап 1. Денатурация
Этапы ПЦР Полимеразная цепная реакция состоит из множества циклов. Каждый цикл состоит из 3-х этапов. 1-й цикл – Этап 2. Отжиг праймеров
Этапы ПЦР Полимеразная цепная реакция состоит из множества циклов. Каждый цикл состоит из 3-х этапов. 1-й цикл – Этап 3. Синтез
Циклы ПЦР Полимеразная цепная реакция состоит из множества циклов, для того чтобы амплифицировать необходимое количество фрагментов. Второй цикл реакции (все три этапа)
3-й цикл амплификации
Накопление продуктов амплификации
Формула ПЦР А = М*(1+Е) n А - количество ампликонов М - начальное количество ДНК- мишеней Е - эффективность реакции n - число циклов амплификации. Реальное значение Е – (78-97%)
Как увидеть результат Необязательно увидеть, но можно, если захотеть, при помощи метода горизонтального электрофореза.
Как увидеть результат Необязательно увидеть, но можно, если захотеть, при помощи метода горизонтального электрофореза.
Где используется ПЦР На данный момент ПЦР широко используется в следующих отраслях: - Наука Необходимый этап в большинстве методик анализа ДНК - Медицина диагностика инфекционных заболеваний диагностика генетических заболеваний - Судебная медицина и криминалистика анализ «ДНК-отпечатков»
Спасибо за внимание !