Визначення оптимальних режимів центрифугування крові при проведенні мануального плазмаферезу Лікар - трансфузіолог Загородній Анатолій Валерійович

Мета проведення досліджень Визначення оптимальних режимів центрифугування крові донорів при проведенні мануального плазмаферезу для: отримання плазми відповідної якості за параметром залишкових клітин; скорочення часу на проведення процедури аферезу; мінімального ушкодження клітин крові під час центрифугування.

Обладнання Полімерні контейнери для плазмаферезу 2×500/2×300 фірми «RAVIMED»; Рефрижераторні центрифуги «JOUAN CR 4.12» з радіусом ротора 160 мм; Електронний термометр «Checktemp 1» з ціною поділки 0,1 °С; Високочастотний запаювач трубок «TERUFLEX ACS 152».

Методи досліджень Відбір зразків клітин крові та плазми проводився в полімерні трубки контейнерів; Визначення залишкових клітин плазми проводилось шляхом підрахунку в лічильній камері Фукса-Розенталя (еритроцити та лейкоцити) та лічильній камері Горяєва (тромбоцити); Визначення ушкодження еритроцитів після центрифугування крові проводилось шляхом мікроскопії в нативному мазку зразків еритроцитної маси.

Предмет досліджень Залишкових клітин в плазмі згідно рекомендацій Ради Європи має бути: еритроцити – не більше 6,0×10 9 /л; лейкоцити – не більше 0,1×10 9/ л; тромбоцити – не більше 50×10 9 /л; Температура клітин крові перед реінфузією має бути не нижче 20 °С; Еритроцити повинні зберігати свою звичайну форму – дискоїдну.

Режими центрифугування крові Режим центрифугу вання крові Кількість обертів ротора центрифуги в хв. Час центрифугу вання в хв. Температура роторної камери в °С 1 (2000g) (2000g) (3000g) (3000g) (4000g)

Середня температура крові до та після центрифугування Режим центрифугування крові Кількі сть доз Температура крові до центрифугування в °С Температура крові після центрифугування в °С 1 (2000g, 10˚С)3529,5 (26,9-32,5)17,8 (14,3-24,8) 2 (2000g, 10˚С)3229,0 (27,0-31,4)17,0 (14,3-20,1) 3 (3000g, 5-8˚С)323229,0 (24,4-30,5)17,6 (14,2-22,0) 4 (3000g, 20˚С)3128,9 (26,4-30,7)23,0 (21,3-24,5) 5 (4000g, 2-5˚С)3329,1 (26,1-30,8)19,6 (17,1-23,3)

Середня кількість залишкових клітин в плазмі Режим центрифугу вання крові Залишкові еритроцити плазми в 10 9 /л Залишкові лейкоцити плазми в 10 9 /л Залишкові тромбоцити плазми в 10 9 /л 1 0,097 (0,03-0,3) 0,011 (0,003-0,03) 31,1 (12-74) 2 0,162 (0,03-1,1) 0,012 (0,004-0,06) 22,4 (12-50) 3 0,066 (0,01-0,2) 0,007 (0,003-0,03) 18,6 (12-40) 4 0,109 (0,01-0,65) 0,006 (0,001-0,02) 43,6 (18-88) 5 0,108 (0,03-0,8) 0,01 (0,003-0,02) 22,8 (6-66)

Форма еритроцитів після центрифугування крові Режим центрифугува ння крові Кількість доз Дискоїдна, доз Частково деформована, доз Сферична, доз 1 (2000g, 15 хв.) 3511 (31%)19 (54%)5 (15%) 2 (2000g, 20 хв.) 32-5 (16%)27 (84%) 3 (3000g, 15 хв.) (31%)19 (59%)3 (10%) 4 (3000g, 15 хв.) 317 (22%)22 (71%)2 (7%) 5 (4000g, 10 хв.) 3329 (88%)4 (12%)-

Результати 1. При режимах центрифугування «1», «2» та «3» середня температура крові після центрифуговання знаходилась в межах 17,0-17,8°C; 2. При температурі приміщень для проведення заготівлі плазми мануальним методом від 21 до 27 °C зберегти середню температуру крові після центрифуговання вище 20°C вдалося в режимі «4» (3000g, t 20 °C, 15 хв.);

3.При центрифугуванні крові в режимі «4» (3000g, t 20 °C, 15 хв.) середня температура крові після центрифугування зберігалась на рівні 23 °C, що впливало на якість плазми за показником залишкових тромбоцитів – клітин більше 50×10 9 /л в 39% досліджених зразків; 4.Температура окремих доз крові до та після центрифугування знижувалась в середньому на 2-3 °С при падінні температури приміщень для проведення заготівлі плазми методом плазмаферезу з °С до °С; Результати

5. При центрифугуванні крові на протязі 20хв. (режим «2»: 2000g, t 10 °C) еритроцити втратили дискоїдну форму у 84% досліджених зразків; 6. Еритроцити у 88% досліджених зразків зберігали дискоїдну форму при центрифугуванні на протязі 10 хв. (режим «5»: 4000g, t 2-5 °C); Результати

Найбільш оптимальним із досліджених режимів центрифугування крові донорів при проведенні мануального плазмаферезу є режим «5» (4000g, t 2-5 °C, 10 хв.) з причини: – найкоротшого часу на проведення розділення крові, – найменшого негативного впливу на еритроцити – збереження звичайної дискоїдної форми еритроцитів під час центрифугування, – підтримання середньої температури клітин крові після центрифугування на рівні, близькому до 20,0 °C (19,6 °C), – задовільних показників параметру залишкових клітин в заготовленій плазмі. Висновок

Пропозиції 1. Оптимальні режими центрифугування крові при проведенні мануальних аферезів плазми Відцентрове прискорення в g Температура роторної камери в °С Час центрифугування в хвилинах

Пропозиції 2. Внести зміни в нормативні документи з використання донорського плазмаферезу згідно наведеної таблиці центририфугування крові 3. Використовувати швидкісні центрифуги ( g) при заготівлі плазми мануальним методом аферезу;

Пропозиції 4. В залежності від температури приміщень для проведення мануального плазмаферезу, моделей центрифуг та терміну центрифугування крові коректувати температуру роторних камер центрифуг, які використовуються для центрифугування крові донорів мануального плазмаферезу, таким чином, щоб середня температура клітин крові після центрифугування зберігалась на рівні 21,0±1,0.

Перелік використаної літератури 1. GUIDE TO THE PREPARATION, USE AND QUALITY ASSURANCE OF BLOOD COMPONENTS», 11th edition, the Council of Europe 2005 – Part B: Chapter 3; Part С: Chapter 15; р , ; 2.Техническое руководство Американской ассоциации банков крови, 12-е издание, издано Европейской школой трансфузионной медицины в 2000 г., перевод с английского под редакцией проф. Ю.Н. Токарева – Раздел VІІ: Метод 9.14., 10.5.; стр , ;

Перелік використаної літератури 3.KRWIODAWSTWO I KRWIOLECZNICTWO. ZBIOR PRZEPISOW. Pod redakcja Jana Sablinskiego I Magdaleny Letowsksej – Warszawa, Rozdzial 6; 3.2. Wirowanie; 69-70; 4.«Гравитационная хирургия крови»; Под редакцией академика АМН СССР О.К. Гаврилова – Издательство «Медицина», Москва, Часть I, глава 1, стр. 7-16; 5.Інструкція з проведення плазмаферезу, наказ МОЗ України 164 від