Студентки 2-го курсу 11-б група Дзюбенко Анастасія Григорівна ВНМУ ім. М.І.Пирогова Кафедра загальної хірургії Тема: «Методи визначення груп крові»
Групи крові: І група (аглютиноген(-), аглютиніни (α,β)); II група (аглютиноген(А), аглютинін (β)); III група (аглютиноген(В), аглютинін (α)); IV г рупа (аглютиноген(А,В), аглютиніни(-));
Стандартні сироватки. Методика визначення: на спеціальній тарілці (з 6ма луночками) наносять по краплині сироватки І, II, III груп крові двох різних серій, поряд крапля крові, що досліджується; співвідношення крові до сироватки 1:10 (1 частина крові, 10 частин сироватки); потрібно зберегти необхідний титр антитіл; змішують ці дві краплини (аглютинація повинна настати через 30 сек.).
Результати: І група якщо аглютинації в І, II, III луночках не наступає; II група аглютинація наступила в луночках І та III гр., але не наступила в лунці II гр. -група ІІ(А); III група аглютинація з сироватками І та II гр. група Ш(В); IV група аглютинація з сироватками всіх 3-х груп група IV(АВ);
Визначення по стандартних еритроцитах. Методика визначення: з вени хворого беруть 3-4 мл. крові в пробірку та центрифугують, на тарілку в лунки (згідно позначок груп) наносять по краплині сироватки реципієнта, до кожної лунки додають по краплі стандартних еритроцитів в 10 раз менше обєму сироватки.
Результати: аглютинація (-) з еритроцитами І групи і (+) з еритроцитами ІІ (А) і ІІІ(В) досліджувана кров І(0) групи. аглютинація (-) з еритроцитами І(0) та ІІ (А) і (+) з еритроцитами ІІІ (В) кров, що досліджується, ІІ (А). аглютинація (-) в еритроцитах І і ІІІ та (+) з еритроцитами ІІ(А) -група ІІІ(В). аглютинація (-) з еритроцитами I(0), ІІ(А), ІІІ(В) кров, що визначається IV групи (АВ).
Визначення з допомогою цоліклонів (антитіл А та В) Методика визначення: ( t°-15-25°С) на тарілку наносять по 1 краплі цоліклона анти-А і анти-В, поряд наносять по 1 краплі крові (в 10 раз менше краплі цоліклона) змішують. Спостерігають 2,5 хв. Реакція настає через 3-5 сек.
Результати: аглютинація відсутня з цоліклоном анти- А і анти-В (кров не містить аглютиногенів А і В) кров І(О) групи; аглютинація утворюється з цоліклоном анти-А еритроцити крові, що визначається, містить аглютиноген А кров ІІ(А) групи; аглютинація утворюється з цоліклоном анти-В кров містить аглютиноген В -кров ІІІ(В) групи; аглютинація утворюється з цоліклонами анти-А і анти- В кров IV(АВ) групи.
Визначення крові на Rh-фактор. кров, що дoсліджують, беруть в суху пробірку без стабілізатора (2-3 мл); з дна пробірки (згусток) беруть завись еритроцитів (5-10%); на чашку Петрі наносять по 2 краплі сироватки антирезус (2-х серій) і до них додають по 1 краплині зависі досліджуваної крові. Змішують їх; чашку Петрі поміщають на 7-10 хв. на водяну баню при температурі 45°С. якщо кров аглютинується обома серіями сироватки антирезус то кров Rh(+).
Індивідуальна проба на Rh- сумісність: на чашку Петрі наносять 1 краплю сироватки крові (хворого, якому перелив.кр.) та маленьку краплину крові, що переливають хворому (у співвідношенні 1 : 10). краплі змішують та ставлять на водяну баню (10 хв.) при 1; 42-45° С. якщо наступила аглютинація кров несумісна по Rh-фактору, її переливати неможна.
Serafol AB0 і Serafol AB0 + D Картки з моноклональними антитілами з можливістю зберігання при кімнатній температурі. Мета тестування: – перевірка ідентичності безпосередньо перед переливанням крові (діагностика біля ліжка хворого )
Принцип тестування: гемоагглютинаційний аналіз, призначений для визначення відповідних антигенів до еритроцитів.
Процедура тестування: 1. Нанести по одній краплі крові реціпієнта на кожне поле в одному ряду. 2. При використанні еритроцитарної маси (дози донорської крові) спочатку нанести на кожне поле в одному ряді по одній маленькій каплі ізотоніч. фізіолог. р-ну чи води, потім еритроцити. 3. Змішуйте приблизно 30 с. з допомогою палички для нанесення до повного розчинення реагентів. 4. Обережно помахайте картою протягом с. і оцініть результати.
Результати тестування: Аглютинація = позитивна реакція Немає аглютинації = негативна реакція
Вісім можливих поєднань відповідно з групою крові ( A, B, AB і O з позитивним чи негативним резус -фактором D )
Причини помилкових позитивних р-татів: висихання; " монетні стовпчики " (слабка аглютинація)
Причини помилкових негативних результатів: занадто великі або занадто маленькі краплі крові; низька концентрація еритроцитів (менше 40 %); термін придатності, невідповідні умови зберігання; гематокрит нижче 15 %
Документація по переливанню компонентів та препаратів крові Наказ МОЗ України від р 164 «Про затвердження інструкцій, регламентуючих діяльність закладів служби крові України», а саме « Інструкція з визначення груп крові за системами АВО та резус» та «Інструкція з переливання крові та її компонентів». Стандартні операційні процедури розроблені на основі інструкції та затверджені головним лікарем.
Наказ МОЗ України від р. 184 «Про затвердження форм облікової статистичної документації, що використовується в стаціонарах лікувально-профілактичних закладів». Наказ МОЗ України від р. 385 «Про інфекційну безпеку донорської крові та її компонентів».
Наказ МОЗ України від р. 301 «Про затвердження форм медичної облікової документації, що використовується в закладах служби крові»
Дякую за увагу!=)