ТИПЫ КУЛЬТУР КЛЕТОК И ТКАНЕЙ Выполнили Мохова С.А Фадеева О. Ю.

Культура клеток - это выращенные in vitro (вне организма) на специальных средах клетки различных тканей животных и человека, в том числе лейкоциты, сохраняющие присущие им обмен и восприимчивость к определенным вирусам.

ТИПЫ КУЛЬТУР КЛЕТОК : первичная культура клеток, получаемая из тканей или органов, взятых непосредственно из организма (культура считается первичной до тех пор, пока её не пересеяли), линия клеток первичная культура со времени получения субкультуры (пересева); стабильная линия клеток клетки, способные размножаться (пересеваться) in vitro до бесконечности; линия диплоидных клеток линия клеток, в которой не менее 75% клеток сохранили нормальный исходный кариотип; штамм клеток популяция однородных по одному или нескольким признакам диплоидных клеток, сохраняющая специфич. свойства в течение определённого периода (до 50 пассажей).

П ЕРВИЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК Источником получения первичных культур клеток являются обладающие большой потенцией роста эмбриональные ткани птиц, экспериментальных животных, обезьян, но чаще всего готовят их из трипсинизированных тканей абортированных 8-14-недельных плодов человека.

У СЛОВИЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ При культивировании наиболее прихотливы клетки теплокровных животных, наименее растений. Для клеток большинства млекопитающих и птиц оптимальная t °С, для клеток насекомых и холоднокровных позвоночных 2025 °С. Для клеток млекопитающих и птиц оптимальное осмотич. давление при t 38 °С 7,6 атм. Клетки большинства животных хорошо растут при рН 7,07,3.

Первичные культуры получают из клеток, выделенных из тканей с помощью протеолитич. ферментов (чаще трипсина). Их, как правило, выращивают в среде, состоящей из солевого р-ра Эрла или Хенкса, 0,5% гидролизата лактальбумина, 0,1 % глюкозы и 510% сыворотки кр. рог. скота. Для выращивания линии клеток и штамма клеток используют синтетич. среды, содержащие аминокислоты, витамины и обогащённые сывороткой и др. важными метаболитами. Такие же среды применяют при длительном культивировании тканей и органов зародышей.

Клетки растут на внутренней поверхности культурального сосуда, смачиваемой питательной средой. Так как диплоидные культуры растут только на поверхности твёрдого субстрата, для их массового выращивания предложены спец. аппараты, обладающие большой внутренней поверхностью. Стабильные линии клеток во мн. отношениях сходны с одноклеточными организмами и с успехом могут расти в перемешиваемой суспензии в металлич. реакторах, полуавтоматических аппаратах.

П ОСУДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ Культуры выращивают в стеклянных, пластмассовых или металлич. сосудах различной формы и ёмкости. Однослойные культуры чаще выращивают в стеклянных пробирках, матрасах Ру или в круглостенных флаконах.

В ЦЕЛОМ ТЕРМИН « КУЛЬТУРА КЛЕТОК, ОРГАНОВ, ТКАНЕЙ » ПРИМЕНЯЕТСЯ АСЕПТИЧЕСКИ ВЫРАЩИВАЕМЫМ ЧАСТЯМ РАСТЕНИЙ : 1. каллусным тканям на гофрированной среде; 2. суспензионной культуре клеток и небольших агрегатов в жидкой среде; 3. культуре протопластов; 4. изолированным зародышам; 5. изолированным органам (кончиков корней, меристемам побегов).

М ЕТОД КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК И ТКАНЕЙ РАСТЕНИЙ ИМЕЕТ СЛЕДУЮЩИЕ ПРЕИМУЩЕСТВА : простоту клеточных моделей; отсутствие коррелятивных взаимодействий и контроля со стороны других тканей, органов, целого организма, что позволяет проследить состояние клетки на уровне первичных элементарных процессов в ответ на любые воздействия; возможность быстро получать достаточную массу в асептических условиях; контролируемые по многим параметрам условия выращивания.

К ЛЕТКИ РАСТЕНИЙ IN VITRO ЯВЛЯЮТСЯ УДОБНОЙ МОДЕЛЬЮ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ МНОГИХ БИОХИМИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ

К УЛЬТУРА КЛЕТОК И ТКАНЕЙ ТАКЖЕ СЛУЖИТ МОДЕЛЬЮ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ К РАЗЛИЧНЫМ НЕБЛАГОПРИЯТНЫМ ФАКТОРАМ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ : абиотическим (засолению, кислой среде, низким температурам и т.д.) биотическим факторам (патогены разного происхождения, вызывающие болезни растений и др.).

Б ИОТЕХНОЛОГИИ НА ОСНОВЕ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТОК И ТКАНЕЙ РАСТЕНИЙ

П РИМЕНЕНИЕ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК, ТКАНЕЙ И ОРГАНОВ РАСТЕНИЙ В НАРОДНОМ ХОЗЯЙСТВЕ