Оптический имиджинг Выполнил: студент ФБ10-01С Ускова Т.А.

Методы оптического имиджинга делятся по разрешению: а)методы клеточного разрешения: - Конфокальная микроскопия - Многофотонная флуоресцентная микроскопия (МФМ) - Оптическая когерентная микроскопия (ОКМ); - Оптическая флуоресцентная просветная томография (ОФПМ) б) методы разрешения на уровне слоев/групп клеток: - Оптическая когерентная томография (ОКТ) в) методы разрешения на тканевом уровне - Оптическая диффузионная томография (ОДТ)

Оптический имиджинг Флуоресцентный имиджинг Биолюминесцентный имиджинг

Высокая чувствительность Нетоксичность Возможность исследования динамики in vivo Отсутствие фона

Направления исследований с использованием оптимизированной люциферазой светляка (Luc2): Картина генной экспрессии Активность клеточных рецепторов Процессинга РНК и белок-белковых взаимодействий Исследования стволовых клеток Процесс апоптоза Наблюдения первичных опухолевых узлов для детектирования метастазов

Рис.1. Определение чувствительности метода биолюминесцентного имиджинга на основе Colo 26-luc2 in vivo. Подкожные инъекции клеток основе Colo 26-luc2 в количестве 25,50,100 и 200. * N.V. Klementyeva, M.V. Shirmanova, E.O. Serebrovskaya at all.: In vivo Bioluminescence imaging of Tumor cells using optimized firefly luciferase luc2, CTM том 5. 3

Биолюминесцентный имиджинг метастазов опухоли основе Colo 26-luc2 * N.V. Klementyeva, M.V. Shirmanova, E.O. Serebrovskaya at all.: In vivo Bioluminescence imaging of Tumor cells using optimized firefly luciferase luc2, CTM том 5. 3

Флуоресцентный имиджинг Конфокальная и многофотонная лазерная сканирующая микроскопия (регистрация сигнала флуоресценции, возбуждаемой в объекте исследования с помощью лазерных остросфокусированных пучков)

Флуорофоры для оптического имиджинга Антитела конъюгированные с флуоресцентной меткой Флуоресцентные белки Кальций чувствительные красители Потенциал-зависимые красители

Флуоресцентные белки GFP белки обнаружены у люминесцирующей медузы Aequorea victorea О. Симомура с соавторами 1962 г. Нобелевская премия за 2008 г. О. Симомура совместно с М. Чалфи и Р. Тсиеном.

Использованные источники N.V. Klementyeva, M.V. Shirmanova, E.O. Serebrovskaya at all.: In vivo Bioluminescence imaging of Tumor cells using optimized firefly luciferase luc2, CTM том 5. 3 James G. Fujimoto, Daniel L. Farkas : Biomedical Optical Imaging, Оxford university press (2009) Оптический имиджинг в приложении к исследованию нейробиологических систем мозга, составитель Митрошина Е.В. Электронное учебно-методическое пособие. – Нижний Новгород: Нижегородский госуниверситет, – 40 с.